Estudo funcional da proteína NS3 do vírus HCV a partir de seqüências codificantes alteradas

• Processo: 09/02887-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Paula Rahal
• Beneficiário: Paola Jocelan Scarin Provazzi
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hcv | Hepatite C | Moldelagem Molecular Comparativa | Ns3 | Proteína Não-Estrutural 3 | Genética Humana e Médica

Resumo

O vírus da Hepatite C (HCV) é o principal agente causador das Hepatites Não-A e Não-B. A estimativa global da prevalência da infecção pelo HCV é de 2,2%, correspondendo a 130 milhões de pessoas HCV positivas no mundo. Um dos alvos mais promissores para a terapia antiviral é a proteína não-estrutural 3 (NS3), que apresenta três funções enzimáticas: 1) atividade de protease; 2) ATPase e 3) helicase. O sucesso com os inibidores de protease do vírus HIV sugere que a protease viral NS3/4A do vírus HCV pode ser um excelente alvo para o desenvolvimento de novas drogas. O trabalho de Doutorado de Paola Jocelan Scarin Provazzi buscou alterações na sequencia gênica codificadora da proteína NS3 do vírus HCV do genétipo 3. Este trabalho identificou, alterações na estrutura terciária da proteína. No domínio Protease foram evidenciadas substituições no sítio ativo da proteína (D81A e D81V) assim como na região de ligação ao íon zinco (C99S). Também foram visualizadas alterações na porção Helicase da NS3. As substituições ocorreram nos sítios de ligação ao ATP (L210E) e ao RNA (W501R). No loop de fenilalanina, foi evidenciada a substituição do resíduo fenilalanina por serina na posição 444. Os resultados obtidos nesse trabalho deixam claro que as funções protease e helicase da proteína NS3 devem ser investigadas nesses casos. Dessa forma, há grande interesse na continuidade desse estudo, sendo proposto o presente trabalho que pretende realizar a análise funcional das proteínas Protease e Helicase, a partir da expressão em sistemas bacterianos, das sequências que possuem as substituições nos resíduos que realizam as funções da NS3. A avaliação da atividade enzimática das proteínas alteradas e suas influências sobre a eficiência da replicação viral poderá contribuir para o desenvolvimento de drogas antivirais mais específicas e melhorar o prognóstico da Hepatite C para os portadores do vírus do genótipo 3. (AU)