Expressão, purificação, reenovelamento e cristalização da proteína da capa viral do Rupestris Stem Pitting associated Virus

• Processo: 08/00309-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Mário Tyago Murakami
• Beneficiário: Joice Helena Paiva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas do capsídeo Expressão de proteínas Purificação de proteínas Cristalografia de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalização | Estrutura | expressão | purificação | reenovelamento | expressão, purificação, reenovelamento e cristalização

Resumo

A cultura da videira está exposta a um grande número de doenças as quais podem gerar perdas significativas na agricultura mundial. Os vírus são os maiores responsáveis por essas doenças. Um exemplo, é caracterizado pelo Lenho Rugoso da Videira, que se trata de um complexo de quatro doenças, entre elas a de destaque nesse trabalho é o Lenho Estriado ("Rupestris Stem Pitting" - RSP). O lenho estriado tem como agente causador o Rupestris stem pitting associated virus (RSPaV). O genoma desse vírus é composto por cinco cadeias abertas de leitura, sendo a quinta cadeia a responsável pela produção da proteína capsidial que possui uma massa molecular de 28 kDa. Um dos meios de transmissão do RSPaV é através da enxertia de gemas infectadas. Quando a planta está infectada ocorre um declíneo no crescimento das videiras, na qualidade e produção dos frutos. Os períodos de até dois anos para o aparecimento dos sintomas dificultam a detecção do vírus do Lenho Estriado. Além disso, observa-se uma irregularidade na distribuição do vírus na planta que também varia de acordo com a época do ano. Com isso, há a necessidade de um método mais eficiente na detecção do vírus. Estudos estruturais da capa protéica podem contribuir para o desenvolvimento de um método mais eficaz na detecção do vírus na planta. Até o momento, não foi resolvida nenhuma estrutura tridimensional tanto da capa protéica quanto de proteínas funcionais relacionadas a movimentação, replicação e reconhecimento do RSPaV. A realização desse projeto tem como alvo a expressão, purificação, reenovelamento e posteriores ensaios de cristalização da proteína da capa viral do Rupestre stem pitting associated virus.