Caracterizacao molecular de genes que participam da via calcineurina-crza em aspergillus fumigatus.

• Processo: 09/50506-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gustavo Henrique Goldman
• Beneficiário: Taisa Magnani Dinamarco
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 08/56254-2 - Functional analysis of the transcription factor XINR involved in regulation of transcription of cellulases - and hemicellulases-enconding genes in Aspergillus niger, AP.BIOEN.TEM
• Assunto(s): Calcineurina Aspergillus fumigatus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus Fumigatus | Calcineurina | Crza | "Docking Site" | S-Tag

Resumo

O A. fumigatus é um fungo filamentoso que apresenta pouca incidência em indivíduos imunocompetentes. Entretanto, nas últimas décadas, esta incidência tem aumentado em pacientes com neutropenia disfuncional na doença granulomatosa crônica e AIDS. Muito pouco é conhecido sobre a regulação dos níveis de cálcio neste fungo e tem sido descrito que os íons cálcio têm importância crucial no controle de vários processos biológicos. A sinalização celular promovida pela fosfatase calcineurina, mediada por cálcio, altera o nível de expressão de diversos genes. A modulação da transcrição gênica pela calcineurina está relacionada à ativação de fatores de transcrição específicos que possuem motivos de ligação (docking site) à calcineurina, semelhantes à PxIxIT encontrados no NFAT e Crz1. Para a elucidação desta via de sinalização, foram realizadas análises computacionais que revelaram a presença de docking site para calcineurina em diferentes genes e fatores de transcrição. O presente projeto visa a caracterização molecular dos fatores de transcrição Rpn4 e Seb1 e do trocador Ca2+/H+ vacuolar em A. fumigatus, que apresentaram o motivo semelhante ao PxIxIT, o que permitirá a avaliação das alterações fenotípicas destes mutantes, bem como o entendimento da transdução de sinal mediada por cálcio. Além disto, serão determinadas e caracterizadas as proteínas que interagem com a calcineurina durante a sinalização celular. Para tanto, a abordagem adotada será a inserção de uma cauda S-tag na calcineurina, a qual permitirá sua posterior purificação, bem como das proteínas interagidas a ela, permitindo a identificação. (AU)