Produção em bactéria de uma metaloprotease hemorrágica de veneno de serpente

• Processo: 01/09451-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2001
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Heloisa Sobreiro Selistre de Araújo
• Beneficiário: Lucas Tabajara Parreiras e Silva
• Instituição Sede: Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS). Universidade Federal de São Carlos (UFSCAR). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Hemorragia Clonagem Venenos de serpentes Metaloproteinases Proteínas recombinantes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Clonagem | Expressao | Hemorragia | Metaloprotease | Refolding | Veneno De Serpente

Resumo

A ACLH-I, uma metaloproteinase hemorrágica presente no veneno de Agkistrodon contortrix laticinctus, será produzida em bactéria, a partir de um DNA isolado e seqüenciado obtido de uma biblioteca de cDNA feita das glândulas veneníferas da mesma serpente citada acima. Esta enzima é muito similar à ACLF, fibrinolítica, proveniente também da Agkistrodon c. laticinctus, porém esta última não possui um sítio potencial de glicosilação presente na ACLH-I, o que pode estar relacionado com a diferença em suas atividades. Tem-se como objetivos: desenvolver um sistema eficiente de expressão da ACLH-I em E. coli, linhagem BL21 (DE3), através do vetor pET28a e testar a atividade hemorrágica, fibrinolítica e proteolítica sobre substratos sintéticos da proteína recombinante. (AU)