Imobilizacao do receptor purinergico p2x2 em fase estacionaria de co luna de cromatografia por afinidade.

• Processo: 03/05905-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Alexander Henning Ulrich
• Beneficiário: Cleber Augusto Trujillo
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 01/08827-4 - Modulação artificial da diferenciação neuronal e função de receptores por oligonucleotídeos sintéticos atuantes aos níveis gênico e protéico, AP.JP
• Assunto(s): Receptores purinérgicos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Coluna De Afinidade | Imobilizacao De Receptor | P2X2 | Receptores Purinergicos

Resumo

Nucleotídeos de purina são importantes moléculas sinalizadoras que agem juntamente a outros neurotransmissores, nos processos de resposta celular. Os receptores ativados por nucleotídeos de purina são expressos na superfície celular e denominados P2, são subdivididos em P2Y metabotrópicos e P2X ionotrópicos. De modo geral, uma aplicação de ATP em células neuronais causa em P2X um influxo não seletivo para os cátions Na+, Ca2+ e K+; resultando na despolarização do potencial da membrana e em um aumento na concentração intracelular de cálcio. O receptor P2X2 é expresso principalmente no Sistema Nervoso Central e Periférico, sendo sensível ao antagonista suramina. Porém, não há nenhum agonista ou antagonista seletivo ao receptor. A seleção de ligantes específicos, o entendimento de processos fundamentais de ação da droga, além da dinâmica envolvida no mecanismo de interação intermolecular podem ser estudados através da imobilização de P2X2 em coluna de afinidade. Este estudo tem por finalidade clonar e expressar o receptor P2X2 em células eucarióticas, extrair e imobilizar o receptor funcional em fase estacionária de coluna de afinidade e a realização de ensaio de ligação por ligante específico marcado radioativamente (y32P ATP). Para trabalhos futuros, podemos usar esta metodologia para testar a ligação de toxinas e compostos isolados de bibliotecas randômicas de RNA ou DNA. (AU)