Melanopsinas em vertebrados nao mamiferos: funcao e transducao do sinal luminoso.

• Processo: 09/53533-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Comparada
• Pesquisador responsável: Ana Maria de Lauro Castrucci
• Beneficiário: Leonardo Henrique Ribeiro Graciani de Lima
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 06/03381-1 - Fisiologia comparativa de relógios periféricos: genes de relógio (CLOCK, PER1, PER2, CRY1 e BMAL 1) e sua modulação por luz e hormônios em peixes, anfíbios e mamíferos, AP.TEM
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/23930-8 - Melanopsina em vertebrados não mamíferos: função e transdução do sinal luminoso, BE.EP.PD
• Assunto(s): Interferência de RNA GMP cíclico Melanopsinas Genes de relógio Óxido nítrico Cálcio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Calcio | Genes De Relogio | Gmpc | Melanopsina | Oxido Nitrico | Rna De Interferencia

Resumo

O presente projeto tem como objetivo investigar a funcionalidade das duas melanopsinas (OPN4x e OPN4m) encontradas nos vertebrados não mamíferos e também comparar a via de transdução de sinal intracelular destas em resposta a estímulo luminoso. Para que esse objetivo seja alcançado propomos que esta análise seja feita em culturas de células de vertebrados não mamíferos: cultura de células da retina de embriões de galinha; melanóforos do anfíbio Xenopus leavis; linhagem de células embrionárias ZEM-2S do teleósteo Danio rerio. Para avaliar a resposta de cada melanopsina, pretendemos silenciar a expressão gênica da outra nestes modelos celulares por meio de RNA de interferência. Acompanhar as respostas a estímulo luminoso com microscopia confocal, e identificar se as vias de transdução de sinal descritas na literatura para OPN4m em mamífero funcionam da mesma forma para as duas melanopsinas em vertebrados não mamíferos e portanto são redundantes nestes organismos, ou se diferenças entre estas podem significar a perda de um mecanismo de sincronização em mamíferos. (AU)