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Regulação da expressão e caracterização de tiorredoxina peroxidase mitocondrial

Processo: 00/12583-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2001
Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2002
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Luis Eduardo Soares Netto
Beneficiário:Gisele Monteiro
Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:95/09710-0 - Oxidação de proteínas e atividade antioxidante da enzima 'Thiol Specific Antioxidant' (TSA), AP.JP
Assunto(s):Leveduras   Antioxidantes   Peroxidase   Expressão gênica   Tiorredoxinas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Antioxidante | Expressao Genica | Levedura | Peroxidase | Tiorredoxina

Resumo

Os seres vivos que respiram estão constantemente sujeitos a estresse oxidativo. Para se protegerem contra as propriedades deletérias de espécies reativas de oxigênio, foram desenvolvidas defesas antioxidantes. Tiorredoxina peroxidase mitocondrial (mTPxI) é uma proteína antioxidante de leveduras que apresenta alta homologia a TPxI citossólica codificada pelo gene TSA1. O presente projeto de pesquisa se propõe a estudar a regulação da expressão de mTPxI como forma de compreender a função desta proteína dentro do complexo sistema de defesas antioxidantes. Resultados preliminares obtidos durante o programa de iniciação científica da aluna mostraram que o mecanismo de indução de mTPx em resposta a diferentes tipos de estresse oxidativo é complexo e envolve pelo menos três fatores de transcrição distintos. Pretendemos caracterizar melhor esses mecanismos regulatórios, analisando a interação desses fatores de transcrição com o promotor de YBL064C por gel shift. Outros pontos a serem investigados serão: a atividade enzimática de mTPxI, utilizando proteína super-expressa em bactérias e purificada por imuno-afinidade; e a localização de mTPxI na mitocôndria de leveduras. Estudaremos também, em colaboração com o grupo do Dr. Anibal Vercesi, o possível envolvimento de mTPxI na inibição da permeabilização da membrana interna da mitocôndria e na morte de leveduras induzida pelo aumento de concentração de cálcio citossólico. (AU)

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