Validação de um ensaio imunocromatográfico para o diagnóstico de Escherichia coli ...
- Auxílios pontuais (curta duração)
| Processo: | 00/02988-3 |
| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Vigência (Início): | 01 de junho de 2000 |
| Vigência (Término): | 31 de maio de 2004 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada |
| Pesquisador responsável: | Solange Barros Carbonare |
| Beneficiário: | Jose Araujo Amaral |
| Instituição-sede: | Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil |
Resumo O projeto visa estabelecer uma metodologia de purificação de anticorpos, em média escala, a partir do processamento de ovos de galinhas imunizadas com EPEC e STEC. Inicialmente, será enfatizada a produção de anticorpos da classe IgY (equivalente a IgG de mamíferos) a partir da gema dos ovos. Posteriormente, será investigada a viabilidade de produção de IgM e IgA a partir do processamento da clara dos ovos. O procedimento de purificação consistirá na combinação de métodos de precipitação por sulfato de amônio e cromatografia por colunas de afinidade. As preparações obtidas serão submetidas à análise por dosagem de proteínas totais, imunodifusão radial quantitativa e SDS-PAGE. A reatividade das preparações será verificada por ensaios de westernblot e ELISA. A ação biológica das preparações será avaliada por ensaios de inibição da adesão bacteriana a células em cultura, ensaios de atividade bactericida, ensaios de inibição do crescimento bacteriano em cultura, e ensaios de inativação bacteriana com posterior inoculação intraperitoneal das bactérias em camundongos. (AU) | |