Importância da atividade peptidásica de proteínas da família da HSP60 em processos fisiopatológicos: possíveis implicações em mecanismos de agressão e defesa

• Processo: 00/02236-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2000
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2001
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Antonio Carlos Martins de Camargo
• Beneficiário: Simone dos Reis Barbosa
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/02850-1 - Processamento proteolítico de peptídeos bioativos e toxinas, AP.TEM
• Assunto(s): Chaperoninas Enzimas proteolíticas Mycobacterium leprae Proteólise
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Chaperoninas | Citotoxicidade | Enzimas Proteoliticas | Hsp60 | Substratos Fluorescentes

Resumo

A partir de uma solução homogênea da HSP65 recombinante de Mycobacterium leprae demonstramos, recentemente, que essa proteína apresenta forte atividade peptidásica. Esse achado, inédito na literatura cientifica, abre uma enorme perspectiva nessa área, uma vez que essa atividade proteolítica pode estar implicada em inúmeros processos fisiopatológicos envolvendo essa classe de proteínas de choque térmico. As proteínas da classe da HSP60 são altamente conservadas da bactéria ao homem e, portanto, é esperado que a atividade proteolítica encontrada na HSP65 da Mycobacterium leprae seja uma propriedade comum dessa classe de HSPs. O presente projeto propõe a clonagem, expressão e purificação da HSP60 humana e comparar sua atividade proteolítica com HSP65 Mycobacterium leprae sobre substratos polipeptídicos. Verificaremos também se sua atividade proteolítica é regulável por nucleotídeos e por inibidores. Através do alinhamento de seqüência de aminoácidos dessa molécula, com a seqüência primária de proteases conhecidas, procuraremos verificar se é possível identificar resíduos de aminoácidos envolvidos na atividade proteolítica e demonstrar sua participação através de mutação sítio-dirigida. Por fim, procuraremos correlacionar a atividade proteolítica de HSP65 e HSP60 em processos fisiopatológicos que envolvam essa classe de proteínas de choque térmico. (AU)