Investigacao da interacao entre a fosfolipase a2 lisina 49 (pla2-lis49) de bothrops jararacussu e membranas artificiais.

• Processo: 97/14370-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 1998
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Richard John Ward
• Beneficiário: Arthur Henrique Cavalcante de Oliveira
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 96/11165-3 - Investigação da relação entre estrutura e função em fosfolipase lisina 49, AP.JP
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Espectrofluorescencia | Fodfolipsase A2 - Lis49 | Membrana Artificial | Proteinas De Membranas | Relacao Estrutura/Funcao

Resumo

As fosfolipases A2 (PLA2) são enzimas que catalisam a hidrólise de ligações ácido-éster na posição sn-2 dos fosfolipídios, liberando ácidos graxos e lisofosfolipídeos. Os produtos da hidrólise dos fosfolipídios são utilizados como substrato para a produção de ácido aracadônico e tem um padrão de regulação da resposta inflamatória e agregação de plaquetas. Devido a essas funções regulatórias, as fosfolipases são alvos em potencial para a intervenção química no tratamento de doenças como artrite. Assim, o entendimento das interações enzima / lipídeo é fundamental para o desenvolvimento de novos medicamentos. A bothropstoxina I (BthTX-I) é uma fosfolipase A2 que apresenta uma substituição no sítio ativo de sua seqüência polipeptídica. O aminoácido ácido aspártico está substituído por uma lisina que impede a ligação do cofator essencial, o Ca2+, para a catálise fosfolipásica. Entretanto, a BthTX-I danifica membranas lipídicas por um mecanismo independente do Ca2+ que ainda é pouco conhecido. Recentemente foi proposto um modelo (da Silva Giotto et al, 1997 - Prot. Struct. Funct. Genet. (In press)) sugerindo que uma mudança na estrutura da BthTX-I resulta na desorganização dos lipídeos da membrana e perda da integridade da mesma. Utilizando a BthTX-I de Bothrops jararacussu como um sistema modelo, pretende-se investigar as bases estruturais do mecanismo de danificação à membrana pelas PLA2-Lis49. Várias técnicas bioquímicas e espectroscópicas serão utilizadas para avaliar o modelo proposto pelo estudo das mudanças conformacionais da proteína em solução e associada com membranas artificiais. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CHIOATO‚ L.; DE OLIVEIRA‚ A.H.C.; RULLER‚ R.; SÁ‚ J.M.; WARD‚ R.J.. Distinct sites for myotoxic and membrane-damaging activities in the C-terminal region of a Lys49-phospholipase A2.. Biochemical Journal, v. 366, n. Pt 3, p. 971, 2002. (96/11165-3, 98/14686-0, 98/14569-3, 98/14568-7, 97/14370-0)

WARD‚ R.J.; CHIOATO‚ L.; DE OLIVEIRA‚ A.H.C.; RULLER‚ R.; SÁ‚ J.M.. Active-site mutagenesis of a Lys49-phospholipase A2: biological and membrane-disrupting activities in the absence of catalysis.. Biochemical Journal, v. 362, n. Pt 1, p. 89, 2002. (96/11165-3, 98/14686-0, 98/14569-3, 98/14568-7, 97/14370-0)