Avaliação da estabilidade da forma dimérica na atividade danificadora de membranas Ca+2 independente de bothropstoxina-I da serpente Bothrops jararacussu

Resumo

As fosfolipases A2 (PLA2s) catalisam a hidrólise de pontes ácido-éster na posição sn-2 dos fosfolipídeos. Um sub-grupo das fosfolipases dimericas, as PLA2-Lys49 não apresentam atividade catalítica, mas danificam membranas por um mecanismo Ca2+- independente. Pretendemos usar a botropstoxina-I da B. jararacussu como um sistema modelo para avaliar a hipótese que mudanças na estrutura quaternária de PLA2-Lys49 são a base estrutural desta função, usando métodos de mutagênese sítio-dirigida para gerar mutantes da proteína na região da interface dimérica. A estabilidade do dímero e a atividade da proteína recombinante em interação com membranas artificiais serão analisadas através de técnicas de espetro-fluorescência (supressão e anisotropia). Os resultados serão interpretados na base da importância da forma dimérica na atividade Ca2+ independente dos PLA2-Lys49. (AU)