| Processo: | 03/02366-0 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de setembro de 2003 |
| Data de Término da vigência: | 31 de março de 2007 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular |
| Pesquisador responsável: | Angela Kaysel Cruz |
| Beneficiário: | Juliano Simões de Toledo |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Leishmania major Virulência |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Gene Targeting | Homologous Recombination | Leishmania Major | Miniexon | Rrna Locus | Virulence |
Resumo O presente projeto visa estudar os mecanismos envolvidos no fenômeno de atenuação da virulência observado por Antoniazi e col., em projeto desenvolvido neste laboratório, que mostrou que a super-expressão do gene miniexon de Leishmania major, envolvido no processo de "trans-splicing", atenua o padrão da infecção de linhagens originalmente virulentas em camundongos BALB/c "in vivo". Conduziremos estudos comparativos entre as linhagens atenuada e parental virulenta através da caracterização do perfil de proteínas total nas diferentes linhagens e posterior identificação das proteínas diferendalmente expressas. Também avaliaremos comparativamente as populações\de RNA (poliadenilado ou não) presentes nestes transfectantes e os transcritos de interesse serão caracterizados. Outro objetivo contemplado neste projeto é a construção de um vetor "shuttle" que se integre, por recombinação homóloga, no lócus do rDNA, cujo promotor, reconhecido pela RNA polimerase I (Pol I), induz alta taxa de transcrição constitutivamente. Diferentes versões do recombinante serão construídas, nas quais variantes do gene miniexon serão inseridas no contexto cromossômico com o intuito de gerar linhagens atenuadas estáveis, com uso potencial para o desenvolvimento de uma vadna segura contra a leishmaniose. As possíveis alterações moleculares induzidas pela superexpressão das diferentes versões do miniexon serão avaliadas após transfecção em Leishmania. (AU) | |
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