Avaliação da atividade enzimática de mutações novas em genes esteroidogênicos responsáveis por hiperplasias congênitas da adrenal

• Processo: 01/06255-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2001
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Maricilda Palandi de Mello
• Beneficiário: Junia Yara Penachioni
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Atividade enzimática Hiperplasia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Atividade Enzimatica | Cyp11B1 | Cyp21 | Esteroidogenese

Resumo

A hiperplasia congênita da adrenal é uma desordem autossômica recessiva caracterizada por erros inatos da esteroidogênese. A deficiência da 21-OH e da 11b-OH são as formas mais comumente encontradas, 90% e 5-8% dos casos, respectivamente. Análises moleculares têm sido realizadas para o rastreamento de mutações nos genes CYP21 e CYP11B1. Trabalhos desenvolvidos em nosso laboratório, possibilitou o estudo de cerca de 80 famílias com pelo menos um indivíduo afetado com a forma clássica da doença, no caso da deficiência da 21-OH e 7 famílias no caso da 11b-OH. Foram encontradas cinco novas mutações nesse estudo. Uma mutação alterando o sítio de "splice" normal foi encontrada tanto em homozigose quanto em heterozigose em quatro pacientes não relacionados. Três mutações "missense" foram determinadas. Apesar de considerarmos as mutações "missenses" como a causa da HCA nas famílias estudadas, é necessária a análise da expressão e da atividade da proteína mutante in vitro para a comprovação do envolvimento dessas mutações com o fenótipo afetado. Além dessas, pretende-se avaliar a possibilidade de criação de um sítio de "splicing" alternativo no íntron 7 por uma alteração nucleotídica encontrada em uma paciente cujo fenótipo não condiz com o genótipo encontrado. Desta forma, o presente projeto tem por objetivo clonar e expressar os genes mutantes CYP21 e CYP11B1 e avaliar as atividades das enzimas suas formas mutantes. (AU)