Estudo da resposta imune de camundongos BALB/c com a proteína recombinante A2 de Leishmania chagasi

Autor(es)

Márcia Mariza Gomes Jusi

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Jaboticabal. 2015-08-20.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias. Jaboticabal
• Data de defesa: 2015-02-12
• Orientador: Rosangela Zacarias Machado

Resumo

O agente etiológico da leishmaniose visceral no Brasil, é a Leishmania chagasi. Ela é transmitida pela picada do flebotomíneo Lutzomyia longipalpis, que adquire o parasito ao realizar o hematofagismo em animais infectados. O presente trabalho teve como objetivo estudar a resposta imune de camundongos BALB/c imunizados com a proteína recombinante produzido a partir do gene A2-L de L. chagasi, amostra isolada de um cão atendido no Hospital Veterinário da FCAV-UNESP, campus de Jaboticabal-SP, e avaliar a capacidade dessa proteína recombinante em induzir imunoproteção nos animais, após desafio com o parasito. Quarenta camundongos foram divididos em quatro grupos: G1, 10 animais inoculados com promastigotas de L. chagasi; G2, 10 animais inoculados com a proteína recombinante A2-L; G3, 10 animais imunizados com a proteína recombinante A2-L e desafiados com promastigotas de L. chagasi; G4, 10 animais inoculados com solução salina (controle negativo). Os parâmetros da resposta imune humoral avaliados foram anticorpos da classe IgG e das subclasses IgG1 e IgG2a, pelo ELISA indireto. Quanto à resposta imune celular, avaliou-se a produção de células CD4+ e CD8+, pela técnica de citometria de fluxo e, as imunomarcações de CD4+, CD8+, iNOS, macrófagos, MHC I, MHC II e Linfócitos B, pela técnica de imunohistoquímica. A produção de citocinas (IL-2, IFN-γ, TNF-α, IL-4 e IL-10), pela técnica de PCR em Tempo Real Quantitativo de Transcrição Reversa (RTqPCR) e, a carga parasitária dos baços dos camundongos infectados com o parasita por qPCR. O grupo G3 teve um padrão de resposta humoral do tipo Th1=Th2, enquanto o grupo G1, o padrão de resposta foi do tipo Th1<Th2. O grupo G3 também apresentou maior produção de linfócitos CD8 e de células expressando MHC I, MHC II e iNOS. O grupo G3 se sobressai na produção de mRNA da IL-2, do IFN-γ e do TNF-α, pelas células do baço. A carga parasitária foi... (AU)

• Processo FAPESP: 11/01961-9 - Imunização de camundongos BALB/c com a proteína recombinante A2 de Leishmania chagasi e estudo da resposta imune celular e humoral
• Beneficiário: Márcia Mariza Gomes Jusi
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado