Detecção de micro-organismos e de seus fatores de virulência na saliva, câmara pulpar e canal radicular de dentes associados ao insucesso endodôntico

Autor(es)

Priscila Amanda Francisco

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2017-02-22

Membros da banca

Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes; Francisco Montagner; José Flávio Affonso de Almeida

• Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes

Resumo

Na microbiota de infecções secundárias/persistentes predominam micro-organismos resistentes aos procedimentos endodônticos, destacando-se entre eles Enterococcus faecalis. A microinfiltração coronária é um agente etiológico do insucesso do tratamento endodôntico, promovendo uma fonte constante de contaminação da saliva para os canais radiculares. Os objetivos do presente estudo foram: a) estudar a composição da microbiota da saliva (S), câmara pulpar (CP) e canal radicular (CR) de dentes com insucesso endodôntico, por meio da técnica de checkerboard, de maneira a verificar a simultaneidade entre as espécies bacterianas presentes nestes três sítios; b) quantificar os níveis de lipopolissacarídeos (LPS) e ácido lipoteicóico (LTA) presentes na S, CP e CR investigados; c) correlacionar as bactérias encontradas entre os sítios, dentro dos sítios e com o LPS/LTA; d) correlacionar os micro-organismos e o LPS/LTA com os aspectos clínicos dos pacientes. Foram selecionados 20 dentes com presença de lesão periapical e necessidade de retratamento endodôntico. Amostras foram coletadas da saliva, câmara pulpar e canal radicular. O DNA destas foi extraído e submetido ao método do checkerboard utilizando sondas para 40 espécies diferentes. As amostras de LPS e LTA foram quantificadas pelos métodos Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) e Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), respectivamente. Bactérias foram detectadas em todas as amostras, tanto Gram-positivas quando Gram-negativas, anaeróbias facultativas e estritas, com média do número de espécies de 35, 20, e 29, para S, CP e CR, respectivamente. As bactérias mais prevalentes, encontradas simultanemanete nos 3 sítios estudados foram: E. faecium, P. micra, F. nucleatum sp. nucleatum, E. faecalis, E. saburreum e C. ochracea. O LPS e o LTA estiveram presentes em 95% e 100% das amostras do CR, com média de 3,26 EU/mL e 578,67 pg/mL. Associações altamente significativas positivas e negativas (p<0,01) foram encontradas entre espécies dentro de cada sítio, sendo 2 positivas na S; 66 positivas e 44 negativas na CP; e 7 positivas e 11 negativas no CR, todas com valores de ODDS > 2 ou < 0,5. Uma associação estatística positiva (p<0,05) entre os sítios dos dentes que apresentavam sinais de microinfiltração (11/20) foi encontrada entre S. oralis da S e S. oralis do CR (p=0,015 e ODDS=7). Nos dentes que não apresentavam sinais de microinfiltração (9/20) uma associação negativa foi encontrada, entre C. showae da CP e C. showae do CR (p=0,048 e ODDS=0,250). Entre a concentração de bactérias Gram-negativas e o LPS, houve quatro associações positivas (V. parvula-CP/LPS-S; C. showae-CP/LPS-S; N. mucosa-CP/LPS-S e C. ochracea-CP/LPS-CR); e duas negativas (F. nucleatum sp. nucleatum-CP/LPS-CP; e D. pneumosintes-CR/LPS-CR) (p<0,01). Entre a concentração de bactérias Gram-positivas e o LTA, houve uma associação positiva (E. hirae-CR/LTA-CP) e três negativas (todas na CP, entre o LTA e E. nodatum, S. mitis e E. nodatum) (p<0,01). Com relação as correlações com aspectos clínicos, três associações negativas significantes (p<0,05) foram encontradas entre dor à percussão e D. pneumosintes, F. periodonticum e E. corrodens. O LPS da S apresentou uma correlação moderada positiva com a presença de fístula (p=0,02). A dor à percussão e o LTA da CP apresentaram uma correlação regular positiva (p=0,035). Concluiu-se que a microbiota do canal radicular associado à infecção secundária/persistente é heterogênea, existindo uma similaridade entre as microbiotas das 3 regiões estudadas, com maior detecção de LTA do que LPS. Associações entre micro-organismos presentes na saliva, câmara pulpar e canal radicular sugerem possível comunicação entre os sítios (AU)

• Processo FAPESP: 15/19215-2 - Detecção de micro-organismos e de seus fatores de virulência na saliva, câmara pulpar e canal radicular de dentes associados ao insucesso endodôntico
• Beneficiário: Priscila Amanda Francisco
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado