Avaliação do papel supressor tumoral de microRNAs da região genômica DLK1-DIO3 no carcinoma papilífero de tireoide

Autor(es)

Leonardo Augusto Marson

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2018-12-14

Membros da banca

Murilo Vieira Geraldo; Cristina Pontes Vicente; Gianna Maria Griz Carvalheira

• Orientador: Murilo Vieira Geraldo

Resumo

O carcinoma papilífero de tireoide (PTC) é o histotipo mais prevalente de carcinomas tireoideanos e sua incidência tem aumentado globalmente. Mais recentemente, a expressão aberrante de microRNAs (miRNAs), pequenos RNAs não codificadores de proteínas, tem ganhado destaque pelo seu potencial diagnóstico e prognóstico para o PTC. Seu potencial terapêutico, no entanto, permanece pouco explorado. Diversos miRNAs situados ao longo da região genômica DLK1-DIO3 apresentam redução global da expressão no PTC. Desta forma, este projeto teve como objetivo a avaliação da atividade supressora tumoral de miRNAs da região DLK1-DIO3 in vitro. Para tanto, foi realizada a predição computacional dos alvos dos 102 miRNAs maduros oriundos da região DLK1-DIO3, aliada à mineração de dados de expressão gênica de amostras teciduais de PTC e tecido tireoideano normal oriundos do Gene Expression Omnibus (GEO) e do projeto The Cancer Genome Altas (TCGA). Uma matriz de interações entre os miRNAs e seus alvos preditos foi então construída e o ranqueamento dos miRNAs de acordo com (i) o número total de alvos preditos; (ii) de alvos já caracterizados como oncogenes ou (iii) de alvos relacionados ao câncer, apontou miR-485-5p como um candidato promissor para as subsequentes análises funcionais. Este miRNA apresenta em sua lista de alvos, enriquecimento para processos importantes para a progressão tumoral, como a migração celular, transdução de sinal e controle da expressão gênica. As análises funcionais mostraram que a transfecção de mimético comercial de miR-485-5p em linhagens de PTC (TPC-1 e BCPAP) foi capaz de inibir a migração, invasão, proliferação e viabilidade celular in vitro, corroborando as análises bioinformáticas iniciais. Interessantemente, estes efeitos foram observados apenas nas linhagens portadoras da mutação BRAFT1799A, indicando influência do background genético do tumor no mecanismo de ação de miR-485-5p. De fato, a restauração de miR-485-5p leva à diminuição da expressão dos genes-alvo preditos GAB2, RAC1 e ICAM1, membros importantes de vias relacionadas à progressão tumoral, apenas na linhagem positiva para BRAFT1799A, BCPAP. Assim, nossos resultados sugerem que miR-485-5p está envolvido na modulação de genes envolvidos em importantes processos relacionados a progressão tumoral, apontando este miRNA como um promissor alvo molecular para o carcinoma papilífero de tireoide. A exploração destes mecanismos moleculares poderá contribuir com novas estratégias terapêuticas para o PTC, especialmente para aqueles pacientes portadores da mutação BRAFT1799A, que tendem a evoluir para o câncer metastático e têm menos opções terapêuticas (AU)

• Processo FAPESP: 16/09107-0 - Avaliação do papel supressor tumoral de microRNAs da região genômica DLK1-DIO3 no carcinoma papilífero de tiroide
• Beneficiário: Leonardo Augusto Marson
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado