Ribosídeo de nicotinamida (NR), uma molécula doadora de NAD+, falha em ativar o metabolismo e retardar o envelhecimento em Caenorhabditis elegans

Autor(es)

Guilherme Tonon da Silva

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2020-02-28

Membros da banca

Murilo Vieira Geraldo; Fernanda Marques da Cunha

• Orientador: Marcelo Alves da Silva Mori

Resumo

A população mundial está envelhecendo cada vez mais, o que tem levado a um aumento na prevalência de doenças associadas ao envelhecimento. A restrição calórica (RC) é uma intervenção conservada evolutivamente que foi mostrada estender o tempo de vida e retardar o início de doenças associadas ao envelhecimento em várias espécies. Porém, uma vez que a RC consiste em uma dieta difícil de seguir, além de eventualmente provocar efeitos colaterais em humanos, a busca por miméticos de RC, bem como o entendimento de seus mecanismos de ação, faz-se necessária. É sabido que parte dos efeitos benéficos da RC depende de um aumento nos níveis de NAD+. De fato, intervenções que elevam os níveis de NAD+, como suplementação com ribosídeo de nicotinamida (NR), um análogo de vitamina B3, foram mostradas prevenir o declínio metabólico associado ao envelhecimento, estimular o metabolismo oxidativo e estender o tempo de vida em camundongos e nematoides, sugerindo um grande potencial desse composto para o tratamento de doenças associadas ao envelhecimento. Porém, diferentemente do esperado, nós não observamos aumento no tempo de vida em C. elegans com NR, nas condições convencionalmente encontradas na literatura. Nós realizamos os experimentos alterando múltiplas condições experimentais, como: usar bactéria viva ou morta para alimentar os nematoides, adicionar FUdR (um inibidor de mitose) ou não, transferir frequentemente os nematoides para placas novas ou mantê-los na mesma placa durante toda sua vida, alterar o tempo de início do tratamento, testar nematoides com diferentes backgrounds genéticos, adicionar NR na placa ou diretamente na bactéria, e até mesmo trocar o fornecedor de NR. Em nenhuma dessas condições foi possível observar um aumento consistente no tempo de vida dos nematoides. Efetivamente, em algumas replicatas houve até mesmo uma diminuição da longevidade. De modo similar, tanto o repórter gênico hsp-6::GFP quanto o sod-3::GFP não foram ativados em resposta ao tratamento com NR, diferentemente do que havia sido mostrado na literatura. Por fim, nas nossas condições, NR não preveniu o declínio de mobilidade relacionado ao envelhecimento nem aumentou a expressão de genes que codificam para enzimas que controlam as principais vias metabólicas (ciclo de Krebs (cts-1), glicólise (hxk-1), gliconeogênese (pyc-1)), conforme determinado por RT-qPCR. Em conjunto, esses dados sugerem que os efeitos do NR no tempo de vida e no metabolismo de C. elegans são menos robustos do que predito anteriormente (AU)

• Processo FAPESP: 17/08829-5 - Investigação da interação de Dicer com a via de sinalização de NAD+ no contexto do metabolismo e do envelhecimento em C. elegans
• Beneficiário: Guilherme Tonon da Silva
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado