Análise dos efeitos e mecanismo de ação do veneno da aranha Phoneutria nigriventer na morfologia e migração de células tumorais: Analysis of the effects and mechanism of action of the Phoneutria nigriventer spider venom on morphology and migration of tumor cells

Autor(es)

Natália Barreto dos Santos

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2019-09-30

Membros da banca

Catarina Raposo Dias Carneiro; Letícia Veras Costa Lotufo; André Luis Bombeiro

• Orientador: Catarina Raposo Dias Carneiro

Resumo

Os gliomas malignos são tumores cerebrais devastadores, originários de células gliais, principalmente de astrócitos. A via RhoA/ROCK regula o citoesqueleto, a morfologia e motilidade celular. Mutações nessa via estão relacionadas com a migração e invasão dos gliomas. A bomba de Na+/K+-ATPase também tem papel na migração e invasividade dessas células. Os venenos animais são uma mistura de moléculas biologicamente ativas com alvos específicos nas células e tecidos. Em cultura primária de astrócitos, o veneno da aranha Phoneutria nigriventer (PnV) (Ctenidae, Araneomorphae) alterou o citoesqueleto de actina (fibras de estresse) e modificou a morfologia celular. Apesar dessas alterações relevantes no citoesqueleto e morfologia, ainda não havia sido investigado se o PnV e seus componentes teriam efeitos sobre a migração celular, invasão e metástase em gliomas. O presente trabalho investigou o papel antitumoral do PnV, in vitro, em linhagens celulares de glioma humano (NG97ht e U-251) descrevendo os efeitos do veneno e de suas toxinas purificadas no citoesqueleto, migração e morfologia das células tumorais. A fim de contribuir para elucidar o mecanismo de ação do PnV, a via RhoA/ROCK e a Na+/K+-ATPase beta2 (AMOG - adhesion molecule on glia) também foram avaliadas. A primeira triagem in vitro dos efeitos antitumorais do PnV bruto demostrou que o veneno é uma mistura de componentes que são seletivos para alvos envolvidos nos mecanismos migratórios das células de glioblastoma. Uma vez que o PnV induziu uma resposta em células neoplásicas, o próximo passo foi identificar as frações e subfrações responsáveis pelos efeitos do veneno. Três frações e doze subfrações - SBs (obtidas da fração mais ativa nos parâmetros examinados) foram testadas e as SBs 1 e 11 foram mais efetivas, diminuindo a migração e a invasão de células de glioblastoma, sendo provavelmente consequência da alteração da morfologia e adesão dessas células. Ademais, SB1 e SB11 aumentaram a expressão da proteína ROCK e da AMOG nas células tumorais, sugerindo que esses mecanismos regulatórios estão envolvidos na ação das toxinas sobre a migração. A inibição da ROCK aboliu os efeitos das toxinas, confirmando que essa via medeia a ação desses componentes do veneno (AU)

• Processo FAPESP: 17/16196-2 - Análise dos efeitos e mecanismo de ação do veneno da aranha Phoneutria nigriventer na morfologia e migração de células tumorais
• Beneficiário: Natália Barreto dos Santos
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado