Atividade biológica de uma nova formulação de anfotericina B solubilizada em nanofragmentos catiônicos de bicamada de brometo de dioctadecildimetilamônio

Autor(es)

Nilton Erbet Lincopan Huenuman

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Conjunto das Químicas (IQ e FCF) (CQ/DBDCQ)
• Data de defesa: 2004-09-17

Membros da banca

Elsa Masae Mamizuka; Elizabeth Pinheiro Gomes Areas; Ana Maria Carmona Ribeiro; Silvia Figueiredo Costa; Marcia de Souza Carvalho Melhem

• Orientador: Elsa Masae Mamizuka

Resumo

A prévia solubilização de anfotericina B (AnB) no versátil brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB), inspirou à avaliação da atividade in vivo de uma formulação DOD/AnB, a partir da análise de sobrevida e o estudo da colonização de órgãos no modelo murino. Nanofragmentos de bicamada obtidos por sonicação com ponteira, empregando 10 mg de DODAB por mL em água Milli-Q, solubilizaram concentrações de AnB ≤ 0,1 mg/mL, formando uma solução coloidal livre de solventes orgânicos. O estado de solubilização foi avaliado por espectrofotometria UV-visível e espalhamento de luz dinânimo, para medir o tamanho dos agregados. Nesta condição, a AnB foi estabilizada na sua forma monomérica produzindo o desaparecimento dos agregados insolúveis da droga. Em contraste com outras formulações lipídicas, a atividade in vivo de DOD/AnB foi equivalente à atividade da tradicional anfotericina B solubilizada em desoxicolato (DOC/AnB), quando administradas intraperitonealmente na dose de 0,4 mg/kg/dia durante 10 dias. Para o baço e rins, o estudo da recuperação de leveduras teve a mesma eficiência em reduzir o número de UFC/gr de tecido. A inexistência de informações sobre a atividade tóxica associada ao uso de DODAB, nos levou a estudar a toxicidade aguda, subaguda e crônica do carreador lipídico, assim como da formulação DOD/AnB, usando o esquema terapêutico previamente descrito. Foram avaliadas a citotoxicidade para células epiteliais renais, e a função hepática e renal junto com as alterações hematológicas e histopatológicas no modelo Swiss webster. In vitro, DOD/AnB apresentou menor citotoxicidade contra células renais em comparação ao convencional DOC/AnB. In vivo, após tratamento com DOD/AnB, a única alteração histológica observada no rim foi a presença de um infiltrado inflamatório na região cortical renal, enquanto o uso de DOC/AnB gerou uma precoce lesão tubular progredindo para um dano glomerular degenerativo. Independentemente da incorporação de AnB, DODAB gerou uma resposta pró-inflamatória generalizada (imunoestimulante) com a formação de um granuloma no sítio de inoculação e um aumento da cápsula esplênica, além de neutrofilía. Em resumo, DOD/AnB foi tão efetivo quanto o tratamento com DOC/AnB no tratamento da candidíase sistêmica no modelo murino, sendo mais barato que outras formulações lipídicas disponíveis comercialmente. A solubilização monomérica e estabilização da AnB em fragmentos de bicamada, na ausência de solvente, apresentou menor nefrotoxicidade em comparação ao DOC/AnB, embora há necessidade de modificações com o objetivo de aumentar a incorporação da droga, diminuindo a concentração do anfifílico, reduzindo os efeitos adversos observados no presente estudo, de modo que esta formulação possa competir com aquelas comercialmente disponíveis. (AU)

• Processo FAPESP: 00/03554-7 - Atividade biológica de uma formulação lipossomal de anfotericina "b" com vesículas catiônicas de brometo de dioctatecildimetilamônio num modelo de candidíase sistêmica
• Beneficiário: Nilton Erbet Lincopan Huenuman
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado