Vesículas extracelulares em células de câncer colorretal: secreção não convencional da proteína tirosina fosfatase de baixo peso molecular e ação sobre fibroblastos humanos = Extracellular vesicles in colorectal cancer cells : the unconventional secretion of low molecular weight protein tyrosine phosphatase and action in human fibroblasts

Autor(es)

Stefano Piatto Clerici

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2021-09-01

Membros da banca

Carmen Veríssima Ferreira; Patricia Xander Batista; Aline Mara dos Santos; Eduardo Galembeck; Gustavo Facchini

• Orientador: Carmen Veríssima Ferreira

Resumo

O câncer colorretal (CRC) foi o segundo tipo de neoplasia maligna que mais acometeu mulheres e o terceiro mais prevalente em homens em todo o mundo no ano de 2020. Quando detectado precocemente, o CRC tem bom prognóstico e a massa tumoral está localizada e contida no lúmen do cólon ou reto. Entretanto, em torno de 15-20% dos casos de CRC evoluem para metástases atingindo outros órgãos e reduzindo a eficiência dos esquemas terapêuticos e contribuindo para a baixa sobrevida dos pacientes. A progressão tumoral é um processo complexo e no contexto molecular, vários aspectos ainda precisam ser esclarecidos. A proteína tirosina fosfatase de baixo peso molecular (LMWPTP) tem participação no processo de metástase e resistência a quimioterápicos em diferentes tipos de tumores, tanto sólidos quanto hematopoiéticos. No contexto do CRC, a LMWPTP está associada com a evolução maligna da doença e com prognóstico menos favorável dos pacientes. Grupos de pesquisa têm-se voltado ao estudo da contribuição das vesículas extracelulares ("EVs" do inglês extracellular vesicles) no processo de educação tumoral uma vez que as EVs são importantes estruturas carreadoras de diversas biomoléculas. O presente trabalho teve como principal hipóteses que a LMWPTP é liberada via EVs de células de CRC para o meio extracelular e que essas EVs interagem com fibroblastos humanos de forma modulá-los. Os ensaios de caracterização mostraram que as EVs secretadas pelas células HCT116 e HT29 são do tipo small extracelular vesicles (sEVs) e que a concentração delas é significativamente maior na linhagem de células HT29, que apresenta maiores níveis proteicos de LMWPTP e da quinase Src em comparação com HCT116. Também se observou a liberação da LMWPTP por meio das sEVs provenientes da linhagem HT29. Em um segundo momento, observou-se que os fibroblastos humanos são capazes de internalizar as sEVs secretadas por ambas as células de CRC. Essas sEVs são capazes de ativar os fibroblastos humanos em fibroblastos associados ao tumor – CAFs (cancer-associated fibroblasts), representados por uma alta quantidade do marcador ?-smooth muscle actin (?-SMA). Em termos de função biológica, tanto as sEVS derivadas de HCT116 quanto de HT29 induziram capacidade migratória nos fibroblastos ativados por meio de um mecanismo de sinalização celular nos fibroblastos dependente de Rho (Ras homolog protein) e dos níveis de fosforilação da quinase de adesão focal - FAK (focal adhesion kinase) e da quinase Src. Em conclusão, os dados sugerem uma forma não convencional de liberação de LMWPTP via sEVs de células HT29 além de que, as sEVs secretadas por células de CRC são capazes de educar fibroblastos humanos de forma a ativá-los em CAFs lhes conferindo capacidade migratória (AU)

• Processo FAPESP: 18/03593-6 - Educação plaquetária e metástase: relevância da LMWPTP e vesículas extracelulares no Câncer Colorretal
• Beneficiário: Stefano Piatto Clerici
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado