Desenvolvimento de formulação farmacêutica para uso tópico: responsividade de linhagens celulares de melanoma humano = Development of pharmaceutical formulation for topical administration: responsiveness of human melanoma cell lines

Autor(es)

Marina Pereira Dias

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2017-03-30

Membros da banca

Carmen Veríssima Ferreira; Silvya Stuchi Maria Engler; Adair Vieira Junior

• Orientador: Carmen Veríssima Ferreira; Karin Juliane Pelizzaro Rocha

Resumo

Resistência a fármacos ainda é um desafio no tratamento do câncer e tem recebido grande atenção na área do tratamento do melanoma. A descoberta de inibidores da B-RAF, como o Vemurafenibe, trouxe um grande avanço no tratamento deste tipo de tumor. No entanto, alguns pacientes desenvolvem resistência a este fármaco, após 6 meses de tratamento. Portanto, a descoberta de novas estratégias para o tratamento do melanoma se torna relevante. Neste contexto, partindo da premissa que a riboflavina irradiada apresenta atividade antimelanoma em modelos in vitro e in vivo, os principais objetivos deste estudo foram desenvolver e caracterizar formulações farmacêuticas para administração tópica da riboflavina (RF), avaliar a responsividade de queratinócitos normais e linhagens de melanoma humano ao tratamento com as formulações e investigar a influência do tratamento com as formulações na biologia de células de melanoma. Foram desenvolvidas quatro formulações a base de Pluronic® (F1, F2, F3 e F4) as quais apresentaram alta eficiência de incorporação desta vitamina e diâmetro médio micelar inferior a 32nm, o que as tornam excelentes para uso tópico. A distribuição populacional das micelas bimodal, à 25 °C, passou a uma distribuição unimodal a 32,5°C e com a incorporação da RF. Além disso, a análise calorimetria exploratória indica um aumento no ?H, apontando que esteja ocorrendo uma interação da RF com a porção correspondente ao core micelar. As formulações apresentaram temperatura de gelificação (Tgel) menor que 25 °C. No contexto de ação biológica, das quatro formulações, as formulações F1 e F2 contendo riboflavina incorporada, seguida de irradiação, apresentam menor efeito citotóxico sobre queratinócitos humanos. No entanto, foram capazes de diminuir a viabilidade das linhagens de melanoma. De forma interessante, observamos que ambas as formulações tenderam a induzir apoptose da linhagem SKMel-103 de forma mais eficiente após 24h de tratamento. Outro ponto que merece destaque foi o fato de que ambas as formulações inibiram o ciclo celular, como indicado pelo aumento da expressão da proteína p21. A formulação F3, per si, apresentou efeito tóxico para as linhagens tumorais, em especial para SKMel-29 PLX R (linhagem de melanoma resistente ao fármaco Vemurafenibe). Sob o ponto de vista molecular, o tratamento desta linhagem com a F3 promoveu inibição da autofagia, evidenciado pelo acúmulo da proteína p62, e inibição da quinase AKT. Nossos achados reforçam a ação antimelanoma da RF e indicam a aplicabilidade das formulações F1 e F2 contendo a riboflavina incorporada, no tratamento deste câncer (AU)

• Processo FAPESP: 15/01138-1 - Riboflavina irradiada em melanoma humano: responsividade de diferentes linhagens celulares e desenvolvimento de formulação farmacêutica para uso tópico
• Beneficiário: Marina Pereira Dias
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado