Modulação do potencial osteoblástico-cementoblástico de clones de células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal via mecanismo epigenético

Autor(es)

Catharina Marques Sacramento

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2019-02-22

Membros da banca

Karina Gonzales Silverio; Rodrigo Augusto da Silva; Thaisângela Rodrigues

• Orientador: Denise Carleto Andia; Karina Gonzales Silverio

Resumo

O ligamento periodontal (PDL) é constituído por populações de células heterogêneas com diferentes capacidades de diferenciação celular. Os mecanismos que regulam o comprometimento de células progenitoras mesenquimais do PDL com fenótipo osteo/cementoblástico ainda não são totalmente compreendidos. Neste trabalho, investigamos o efeito de um modulador epigenético na indução da diferenciação osteo/cementoblástica de clones de células progenitoras mesenquimais do ligamento periodontal humano com marcadores de superfície positivos para CD105 (hPDL-CD105+) que apresentam baixo potencial osteo/cementoblástico (LOP). Estes clones foram pré-tratados com 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC) e Dimethyl Sulfoxide (DMSO) por 48 horas e submetidos a ensaios de mineralização (Vermelho de Alizarina e Xylenol Orange), análise dos níveis de transcritos para os genes ALP, ANXA2, ASPN, BMP2, FGF7, OCN, OPN e RUNX2 utilizando qRT-PCR e análise de metilação/hidroximetilação específica dos genes ASPN, BMP2 e FGF7. A análise dos dados revelou que, o pré-tratamento com 5-aza-dC aumentou a capacidade de deposição de matriz mineralizada de dois clones LOP (L1 e L2), porém diferentes respostas quanto à quantidade de produção de nódulos de cálcio foram encontradas, onde a mineralização de L1 e expressão de genes relacionada a osteo/cementogênese foi maior que L2. Os dados mostraram que o aumento dos níveis de transcritos de BMP2, FGF7 e ANXA2 pode levar a uma melhor resposta osteo/cementogênica, enquanto a elevação da expressão do gene ASPN pode bloquear o desempenho da diferenciação e mineralização de clones LOP. Além disso, níveis elevados de metilação/hidroximetilação de FGF7 estão correlacionados com uma baixa expressão de transcritos para este gene no clone com pouca resposta ao 5-aza-dC (L2). Ainda, o DMSO também aumenta a capacidade osteo/cementoblástica de clones LOP. Estes resultados mostraram que o pré-tratamento com 5-aza-dC e DMSO pode modular positivamente a diferenciação osteo/cementogênica de clones celulares hPDL-CD105+ com baixo potencial osteo/cementoblástico. Esses achados contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos complexos que podem levar as células progenitoras mesenquimais do PDL a regenerar os tecidos periodontais (AU)

• Processo FAPESP: 17/19697-2 - Modulação do potencial osteoblástico/cementoblástico de clones de células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal via mecanismo epigenético
• Beneficiário: Catharina Marques Sacramento
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado