Mecanismos envolvidos na perda óssea alveolar induzida pela doença periodontal em ratos espontaneamente hipertensos: papel do sistema renina-angiotensina e microRNAs

Autor(es)

Victor Gustavo Balera Brito

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Araçatuba. 2023-07-07.
• Instituição: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Odontologia. Araçatuba
• Data de defesa: 2023-06-23
• Orientador: Sandra Helena Penha de Oliveira

Resumo

A doença periodontal (DP) é uma desordem inflamatória prevalente que afeta os tecidos de suporte e proteção dos dentes. Devido sua alta prevalência, é frequentemente associada a comorbidades, como hipertensão, que pode contribuir para sua progressão. O rato espontaneamente hipertenso (SHR) é um modelo que apresenta características semelhantes à hipertensão essencial humana, bem como comprometimento ósseo intrínseco e maior perda óssea alveolar associada à DP. Portanto, o objetivo deste estudo foi investigar dois mecanismos, o sistema renina-angiotensina (SRA) e a expressão de microRNAs (miRNAs), para melhor compreender o aumento da perda óssea alveolar induzida pela DP nesse modelo. Para isso, utilizamos ratos machos Wistar e SHR com 10 semanas de idade e a DP foi induzida por meio de ligadura bilateral inserida nos primeiros molares inferiores e mantida por 15 dias. Para avaliar a participação do SRA, os animais foram tratados com telmisartan (10 mg/Kg/dia) e foram realizadas análises da arquitetura óssea (microCT), expressão dos componentes do SRA, marcadores de formação, remodelamento e reabsorção óssea, bem como a produção de mediadores inflamatórios na mandíbula (RT-qPCR, ELISA e IHC-P). Para investigar a expressão diferencial de miRNAs associado a DP, foi utilizado ensaio de microarranjo e posteriormente análises bioinformáticas para identificar potenciais vias reguladas. Os resultados mostraram que o rato SHR apresentou maior perda óssea alveolar, em comparação ao Wistar (normotenso), o que foi parcialmente prevenido pelo tratamento com telmisartan. Observamos uma redução nos marcadores de osteoclastos (remodelamento e reabsorção), o que foi associada à menor produção de mediadores inflamatórios, inibição do receptor de angiotensina II tipo 1 (Agtr1) e maior expressão do receptor tipo 2 (Agt2r). Entretanto, observamos que a modulação dos componentes do SRA foi similar entre ratos Wistar e SHR, não explicando as diferenças observadas entre os modelos. De forma interessante, a análise de microarranjo revelou um perfil distinto de miRNAs relacionados à resposta imune e metabolismo ósseo nos SHR, bem como miRNAs diferencialmente modulados entre os modelos, previamente não associados à homeostase ou desordens periodontais. Resumidamente, mostramos que os componentes do SRA contribuem significativamente para a perda óssea alveolar, mas não explicam completamente a progressão aumentada observada nos SHR. No entanto, a modulação diferencial de miRNAs nos animais hipertensos sugerem seu envolvimento nessas diferenças, além de destacar potenciais alvos terapêuticos para DP, e outras desordens ósseas, que podem ser de interesse para orientar futuras pesquisas. Nesse sentido, a partir dos miRNAs diferencialmente expressos na DP, elegemos um miRNA de interesse, o miR-127-3p, que apresenta sequência conservada entre múltiplas espécies (incluindo ratos, camundongos e humanos), cuja função na osteogênese são havia sido completamente elucidada. Demonstramos então um efeito inibitório do miR-127-3p na diferenciação osteogênica de células osteoprogenitoras humanas (células mesenquimais estromais da medula óssea), por meio da superexpressão in vitro por meio de um mímico de miRNA. Estudos adicionais são necessários para confirmar um efeito in vivo, mas nossos resultados contribuem para a compreensão da função do miR-127-3p na biologia óssea. Financiamentos: CAPES (código 001), FAPESP (2015/03965-2, 2018/23676-3 e 2021/09597-6). (AU)

• Processo FAPESP: 18/23676-3 - Participação dos microRNAs nas alterações ósseas locais induzidas pela doença periodontal e pelo sistema renina-angiotensina local em ratos espontaneamente hipertensos
• Beneficiário: Victor Gustavo Balera Brito
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado