Estudo da cinética de ligação de cálcio e fluoreto à superfície de estreptococos e sua importância como reservatórios de íons no biofilme dental

Autor(es)

Tarcísio Jorge Leitão

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2012-06-25

Membros da banca

Livia Maria Andaló Tenuta; Cecilia Pedroso Turssi; Fernanda Faot; Carolina Patrícia Aires; Rafael Nobrega Stipp

• Orientador: Livia Maria Andaló Tenuta

Resumo

O estudo das formas de retenção de íons no biofilme dental e dos mecanismos de disponibilização destes para o fluido do biofilme é importante para o entendimento do papel destes reservatórios em interferir na dinâmica do processo de formação da cárie dental. Sabe-se que o fluoreto (F) está ligado ao biofilme por interação com íons cálcio (Ca). Um dos reservatórios que estes dois íons podem formar é o F ligado ao Ca na superfície de bactérias e proteínas da matriz extracelular. Quando o pH do biofilme diminui após a exposição à carboidratos fermentáveis, a liberação destes íons poderia diminuir o potencial de perda mineral, mas isto não está claro na literatura. Além disso, há evidências de que um pré-bochecho com Ca aumente a retenção de F no biofilme e entender a cinética de ligação e liberação destes íons pode ser uma estratégia importante para o desenvolvimento de métodos que os mantenham por mais tempo no biofilme dental. Assim, o objetivo deste trabalho de tese foi estudar a cinética de ligação de Ca e F na superfície bacteriana e sua liberação em função do tempo e do pH do meio. A bactéria Streptococcus mutans cepa IB 1600 foi utilizada em todos os experimentos. Foram realizados experimentos sequenciais in vitro para avaliar a cinética de ligação e liberação de Ca à superfície de S. mutans utilizando soluções contendo 0 (controle), 1 ou 10 mM de Ca. A capacidade de liberação deste reservatório também foi avaliada em situação que simula a queda do pH. Além disso, foi avaliada a capacidade e cinética de ligação de F, na concentração de 52,6 ?M F (1 ppm F), mediada por Ca, às bactérias. A quantidade de Ca e F ligada às bactérias foi estimada após extração desses íons da superfície bacteriana com ácido forte, utilizando dosagem colorimétrica e eletrodo íon-específico, respectivamente. Curvas e parâmetros de cinética de ligação e liberação foram calculados e avaliados como fenômenos bioquímicos. Os resultados mostraram que a ligação de Ca à S. mutans é função da concentração do meio e mostrou ser um fenômeno rápido, onde a máxima saturação é alcançada nos primeiros minutos. Por outro lado, a cinética de liberação mostrou ser um fenômeno mais lento, onde significativa quantidade de íons é encontrada ligada às bactérias mesmo após 60 min de tratamento com solução livre de Ca. Ademais, a liberação parece ser função direta do pH do meio e não influenciada pela quantidade de Ca previamente ligada. A ligação de F às bactérias também mostrou ser um fenômeno rápido, mas não dependente da concentração de Ca ligado às bactérias. A ligação deste último também não foi afetada pela presença de F no meio. De forma geral, os resultados sugerem que a ligação de Ca na superfície bacteriana pode funcionar como um importante reservatório capaz de perdurar por um significativo período de tempo e ser prontamente liberado para o fluido do biofilme durante uma queda de pH. Além disso, a ligação de F às bactérias parece não ser influenciada pela presença de Ca (AU)

• Processo FAPESP: 11/23677-0 - Estudo da retenção de fluoreto no biofilme dental: importância da ligação a íons cálcio na superfície bacteriana e avaliação in situ do potencial anticariogênico
• Beneficiário: Tarcísio Jorge Leitão de Oliveira
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto