Avaliação da influência do tratamento endodôntico em pacientes com doença periodontal crônica através da análise microbiológica por PCR e quantificação de endotoxinas e citocinas pró-inflamatórias

Autor(es)

Thais Mageste Duque

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2013-02-22

Membros da banca

Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes; Celso Neiva Campos; Alexandre Augusto Záia

• Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes

Resumo

A doença periodontal crônica atinge as estruturas de suporte dos dentes e é uma das causas mais importantes da perda dos dentes em adultos. Essa doença de longa duração que não regride com a terapia, já pode ter causado uma alteração irreversível na polpa, mesmo quando clinicamente, responde de forma positiva aos testes de sensibilidade pulpar. Os lipopolissacarideos (LPS) presente nas paredes das bactérias Gram negativas e citocinas pró inflamatórias funcionam como fatores estimulantes para a resposta imune, causando destruição óssea e exacerbando o processo inflamatório. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do tratamento endodôntico em pacientes com doença periodontal crônica, através da análise microbiológica por pcr, quantificação de endotoxinas e monitoramento de citocinas pró inflamatórias em bolsas periodontais e canais radiculares. Foram selecionados 15 dentes com envolvimento periodontal crônico e sensibilidade pulpar positiva. Após o preparo químico mecânico (PQM), os dentes foram divididos em três grupos: G1- sessão única (n=5); GII - Ca(OH)2 associado à clorexidina gel 2% (CHX-gel) (n=5); GIII - Ca(OH)2 + Solução salina (SS). Amostras foram coletadas em três diferentes momentos da terapia endodôntica: inicial, após PQM e após medicação intracanal (MIC) por 30 dias, através de cones de papéis apirogênicos/estéreis. Os microrganismos foram identificados através da técnica molecular do PCR simples (16S rDNA) com o uso de primers específicos para Fusobacterium nucleatum, Prevotella intermédia, complexo vermelho (Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia e Treponema denticola), Gemella morbillorum e Parvimonas micra. Para quantificação de endotoxina foi realizado o teste Lisado de Amebócito Limulus (LAL) e, para a quantificação de citocinas IL1 ?, IL1 ?, TNF ? e PGE2, foi utilizado o ensaio imunoenzimático ELISA. Os resultados mostraram que após 1 ano, dos 15 dentes tratados, 5 foram extraídos. Os outros 10 dentes apresentaram melhora no quadro clínico relacionada à profundidade de sondagem e mobilidade. Nas bolsas periodontais iniciais, pelo menos um dos microrganismos do complexo vermelho estiveram presentes em 12/15 amostras e os 3 juntos estiveram presentes em 6/15. Amostras do canal inicial mostraram a presença de Parvimonas micra e Fusobaterium nucleatum detectadas em 80% dos casos. Não houve associação entre as bactérias encontradas inicialmente nas bolsas e nos canais radiculares. Após o PQM e uso de MIC por 30 dias, houve redução do conteúdo microbiano em ambos os sítios. A concentração de endotoxinas nas bolsas periodontais iniciais foram altas (192,81 EU/mL), mas após o PQM, uma redução (19,65 EU/mL) significativamente estatística foi observada. Os canais radiculares apresentaram concentrações de endotoxinas quase nulas (0,1 EU/mL), sendo compatível com o estado pulpar e assim se manteve durante as outras coletas. Avaliando as medicações testadas, a redução de LPS nas bolsas apresentou melhores resultados com o uso do Ca(OH)2 associado à solução salina (p< 0,05). Houve redução de todas as citocinas pró inflamatórias, quando comparadas às coletas iniciais e após o uso da medicação das bolsas e dos canais, sendo esta estatisticamente significativa em relação a IL1? e TNF?. Não houve correlação positiva entre citocinas e endotoxinas nas bolsas periodontais. Conclui-se que o complexo vermelho está presente na doença periodontal e que a presença de uma medicação intracanal diminui a concentração do LPS e de citocinas inflamátorias nos canais radiculares e bolsas periodontais (AU)

• Processo FAPESP: 10/13984-0 - Análise microbiológica por PCR, quantificação de endotoxinas e monitoramento inflamatório em pacientes com Doença Periodontal Crônica
• Beneficiário: Thais Mageste Duque
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado