Perfil de expressão gênica em cardiomiócitos de rato em cultura, submetidos à sobrecarga mecânica por estiramento

Resumo

Sobrecargas hemodinâmicas prolongadas estimulam mecanismos de sinalização celular instrínsecos do miócito cardíaco, permitindo ao coração apresentar crescimento hipertrófico e preservar a homeostase circulatória. Através da técnica de DNA Microarray, pretende-se estudar os níveis de expressão gênica induzidos em cardiomiócitos submetidos a estiramento e obter informação quantitativa do padrão de expressão dos genes e seu significado fisiológico. Com essa técnica, vários genes específicos (Expressed Sequence tags, ESTs), derivados da porção 3'terminal dos transcritores de mRNA, são depositados, com a ajuda de um dispositivo robótico especial (arrayer), de maneira linear e individual em uma membrana, que depois é hibridizada com os diferentes grupos de cDNA marcados com material fluorescente ou radioisótopos. O cDNA será obtido de cardiomócitos em cultura submetidos a regimes de estiramento diversos com a técnica de RT-PCR. A variedade e a quantidade de genes expressos será baseada na comparação direta entre o universo de cDNA das células submetidas a estiramento e células controle. (AU)