Sequenciamento e expressão de genes de Linfócitos B de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico

Resumo

Este projeto situa-se na área de pesquisa da genética molecular das doenças autoimunes. A patogênese das doenças autoimunes permanece um dos principais assuntos ainda não resolvidos na imunologia. Um dos problemas enfrentados no estudo da autoimunidade é a sua natureza multifatorial, com o envolvimento de vários genes no desenvolvimento da doença, além de outros fatores. O conhecimento dos níveis de expressão gênica nas doenças autoimunes pode fornecer uma base importante para a compreensão dos mecanismos que levam ao caráter autoimune. Escolhemos como modelo de estudo o lúpus eritematoso sistêmico (LES). Neste projeto pretendemos aplicar a tecnologia dos DNA-arrays e sequenciamento do DNA na pesquisa do LES. Construiremos uma biblioteca de cDNA a partir de linfócitos B de um paciente com LES em fase ativa e os clones serão aplicados em membrana de nylon na forma de DNA macro-arrays (1536 pontos). Prepararemos sondas de cDNA radioativas de linfócitos B CD5+ de pacientes de LES e indivíduos normais que serão hibridadas com os DNA macro-arrays. Os genes (clones) que se apresentarem com expressão diferencial (pacientes X indivíduos normais) serão sequenciados e comparados com os dados de bancos como o GenBank, com a finalidade de identificarmos homologia. Dessa forma, esperamos contribuir com o aumento do número de sequências de cDNA disponíveis no GenBank relativas ao lúpus eritematoso sistêmico. (AU)