Controle redox de expressão gênica: caracterização de redes regulatórias e seu envolvimento na diferenciação de células-tronco (stem cells)

Resumo

Neste projeto, pretende-se investigar os eventos moleculares associados a perpetuação e diferenciação de células-tronco (stem cells) em estudos de genômica funcional. Uma vez que esta diferenciação é modulada pelo estado redox celular, parte-se do princípio que espécies reativas de oxigênio e nitrogênio (ERO/ERN) ativam vias de sinalização e/ou eventos transcricionais específicos, culminando na regulação da expressão de grupos de genes (regulons), os quais podem exercer importante função neste processo celular. Assim, propomos a caracterização de padrões globais de expressão gênica em células indiferenciadas e diferenciadas, expostas a ERO e ERN, visando à identificação de genes cuja expressão é alterada nas distintas condições experimentais. Este papel sinalizador das ERO/N será investigado através das oscilações que estas causam no transcriptoma de células-tronco, como as derivadas de cordão umbilical e tecido germinativo embrionário, utilizando cDNA microarrays. Propomos ainda uma análise dos promotores dos genes redox-regulados na busca de elementos cis associados a fatores de transcrição que, juntamente aos seus genes-alvo, servirão de substrato para a elaboração de redes regulatórias transcricionais. Esta organização hierárquica auxiliará na compreensão dos sinais de ativação, elementos regulatórios e genes envolvidos na diferenciação de células-tronco. (AU)