Investigacao sobre elementos envolvidos no controle de expressao genica em leishmania: os genes das fosfoglicerato-quinases como modelos.

Resumo

Nosso laboratório está envolvido na caracterização das regiões extremas dos cromossomos de Leishmania. A caracterização e seqüenciamento de um clone (E8), que representa uma extremidade telomérica do cromossomo 20 permitiu localizar os genes que codificam para as isoformas citosólica (PGKB) e glicossômica (PGKC) da fosfoglicerato quinase. Estes genes passaram a ser o objeto de nosso estudo, pois resultados anteriores sugerem que elementos presentes na região 5' ou 3' do locus da PGKC agem como controladores de replicação e/ou transcrição da molécula epissomal. Para testar essa hipótese propomos estudar as regiões franqueadoras das PGKs, através da geração de quimeras e da substituição de um dos alelos que codifica para as isoformas C e B. Transfectantes de Leishmania portando as quimeras como epissomos ou tendo um dos genes residentes substituídos por um marcador de seleção serão os instrumentos empregados para identificar o elemento regulatório e o nível de atuação do mesmo. Além disso, há evidência de que na região média da CDS das PGKs existe uma seqüência importante para o correto processamento da mensagem ou para permitir a tradução do gene; este elemento também será investigado. (AU)