Efeitos da riboflavina sobre as vias de sobrevivência e morte de queratinócitos: implicações na terapêutica dermatológica

Resumo

A pele constitui a principal interface entre o ambiente e o organismo, sendo considerada uma barreira efetiva contra vários agentes estressores ambientais e endógenos, potencialmente nocivos às células da epiderme. Em resposta ao estresse, os queratinócitos, principais componentes da epiderme, ativam vias de sinalização que podem levar à apoptose ou sobrevivência celular. O balanço entre essas vias determina o destino celular. Assim, considerável atenção vem sendo dada para elucidar os componentes das vias de transdução de sinal envolvidos nesta resposta. Este esforço baseia-se principalmente na convicção de que a compreensão de como as células normais respondem ao estímulo extracelular certamente auxilia a decifrar os problemas envolvidos em inúmeras patologias, além de contribuir no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Nos últimos anos, estudos têm demonstrado diferentes atividades biológicas para a riboflavina e seus fotoprodutos, como antitumoral, anti-inflamatória, indutora de diferenciação e moduladora do estado redox, as quais, em conjunto com sua ação fotossensibilizante, apontam esta vitamina como sendo promissora para a prevenção e tratamento de doenças dermatológicas. Além disso, mecanismos dependentes da modulação de proteínas quinases e fosfatases estão envolvidos na indução de apoptose e diferenciação celular pela riboflavina irradiada. Diante destes fatos, este projeto tem como objetivo investigar os efeitos da riboflavina e de seus fotoprodutos sobre as vias de sinalização que determinam o balanço entre sobrevivência e morte de queratinócitos humanos (linhagem não tumorigênica HaCaT) expostos a diferentes tipos de estresse: choque hiperosmótico, que pode resultar da desidratação, representando um insulto ambiental e estresse oxidativo, o qual pode ser desencadeado in vivo por fatores externos e endógenos como, por exemplo, radiação UV e inflamação. Com este objetivo, as seguintes estratégias serão utilizadas: 1) avaliar a indução de apoptose através de marcadores clássicos como caspases, Bcl-2, Bax e PARP; 2) mapear proteínas quinases e fatores de transcrição envolvidos no processo utilizando-se RT-PCR, gel shift, western blotting e PepChip; 3) avaliar a expressão e atividade de metaloproteinases. Desta forma, a presente solicitação permitirá estender os conhecimentos acerca do potencial terapêutico da riboflavina também na área dermatológica, além de contribuir na compreensão da coreografia de proteínas envolvidas na regulação de eventos bioquímicos complexos e ainda pouco elucidados da pele, abrindo novas perspectivas de aplicações e avanços com caráter inter- e multidisciplinar também na área de cosméticos e no estudo da patogênese de doenças de pele. A presente proposta está vinculada à Rede Nanocosméticos: do Conceito às Aplicações Tecnológicas; (CNPq/MCT; Processo: 555163/05-09). (AU)