Expressão, purificação e caracterização de adesinas na formação de biofilme de Xylella fastidiosa

Resumo

A formação do biofilme durante o processo de colonização da X. fastidiosa é o mecanismo primário de patogenicidade deste fitopatógeno. Quando atinge o estádio maduro, o biofilme ocasiona a obstrução dos vasos do xilema. A primeira etapa para formação do biofilme consiste na adesão das bactérias às paredes dos feixes vasculares. Recentemente, estudos de expressão dos genes que codificam para estas proteínas sugerem que adesinas fimbriais e afimbriais podem ser responsáveis pela adesão da X. fastidiosa no início da formação do biofilme no hospedeiro. Contudo, a função destes genes foi atribuída por homologia com genes de outros organismos. Por este motivo, e devido a grande importância conferida aos estudos de genoma funcional, torna-se necessário o estudo da proteína codificada por estes genes, assim como, sua expressão e caracterização durante a formação do biofilme de X. fastidiosa. O estudo da expressão temporal dessas proteínas pode caracterizar seu papel biológico durante a formação do biofilme e avaliar a relação com a expressão gênica. Nesse projeto é proposta a expressão, purificação e caracterização das adesinas fimbriais PilC e FimA e afimbriais UspA1 e Hsf na formação do biofilme de X. fastidiosa. O entendimento do papel destas adesinas na formação do biofilme de X. fastidiosa poderá futuramente levar a identificação de compostos que atuem no biofilme bacteriano no interior da planta hospedeira, possibilitando um efetivo controle da CVC, doença que afeta 45% dos pomares do estado de São Paulo, causando prejuízos econômicos da ordem de 100 milhões de dólares/ano. (AU)