Análise da expressão gênica diferencial e avaliação laboratorial da mutação T315l por métodos moleculares e cromatográficos em pacientes com leucemia mielóide crônica tratados com inibidores de tirosina quinase

Resumo

O desenvolvimento da Leucemia Mielóide Crônica (LMC) é resultado de uma doença clonal de células-tronco, caracterizada pelo aumento na proliferação dos elementos mielóides em vários estágios de diferenciação. É associada ao cromossomo Philadelphia (Ph). Esta doença é conhecida tradicionalmente como uma doença bifásica ou trifásica (fase crônica, fase acelerada e crise blástica). A fase crônica é habitualmente assintomática ou oligossintomática. Na maior parte dos casos de LMC, a translocação envolve a quebra do gene BCR na localização denominada M-BCR, gerando um rearranjo molecular que cujo produto final é uma proteína de fusão citoplasmática (P210), que possui capacidade de auto-ativação, ou seja, independente das condições fisiológicas, conseguindo interferir ciclo celular. Uma mutação pontual que envolve o resíduo T315 é responsável pela formação de uma ponte de hidrogênio entre a quinase e o mesilato de imatinibe, então nesta posição a treonina é substituída pela isoleucina residual tornando um mutante denominado T315I altamente insensível a droga. A ligação do mesilato de imatinibe ocorre no mesmo sítio de ligação da molécula de ATP impedindo a transferência dos fosfatos do ATP aos substratos subseqüentes, bloqueando a cascata de tansdução de sinais e levando à interrupção da proliferação e a apoptose. Serão utilizadas as técnicas de citogenética convencional para avaliar a presença do cromossomo Ph e técnicas de biologia molecular como amplificação, pesquisa de mutação, PCR em tempo real e cromatografia para detecção e quantificação dos transcritos BCR-ABL. (AU)