Estudo da atividade de hialuronidases solúveis ou encapsuladas em associação ou não com MK886

Resumo

Os venenos e toxinas animais contribuem significativamente para o entendimento e conhecimento da fisiologia humana e são formados por uma complexa mistura de proteínas. Após uma picada, estes compostos podem provocar a perda da integridade tecidual local mediado por miotoxinas, metaloproteases e hialuronidases que facilitam a permeação sistêmica de toxinas. A permeação dos venenos se dá pelo rompimento da matriz extracelular composta por moléculas como fibronectina, laminina, colágeno, proteoglicanas e glicosaminoglicanas. Ácido hialurônico é uma glicosaminoglicana da matriz extracelular e substrato da enzima hialuronidase, presente na maioria dos venenos animais. As hialuronidases isoladas de peçonhas de animais são proteínas ou glicoproteínas in natura, e foram caracterizadas devido a sua capacidade de facilitar a difusão dos venenos. As funções biológicas descritas da hialuronidase são atuar sobre a matriz extracelular alterando sua composição e estrutura e aumentar a absorção de fármacos. Hialuronidases têm sido utilizadas na terapêutica na administração em conjunto com preparações intramusculares e subcutâneas, anestésicos, e no tratamento do infarto agudo do miocárdio. Recentemente tem havido interesse em administrar hialuronidase em conjunto com fármacos antitumorais para o tratamento do câncer. A literatura atual reporta uma série de evidências do papel de mediadores inflamatórios na carcinogênese sendo que, os leucotrienos, em especifico, estão relacionados com a promoção, progressão e metástase dos tumores. Uma provável estratégia na terapia do câncer constitui o bloqueio da via das lipoxigenases, o que pode ser feito, por exemplo, com MK 886. Este é um inibidor especifico da FLAP com ação antitumoral comprovada. Devido a grande mortalidade pelo câncer, principalmente no que se refere ao câncer de pulmão, novas abordagens terapêuticas poderiam trazer benefícios à população. Neste contexto, nossa proposta é o desenvolvimento de microesferas contendo MK886, circundadas por hialuronidase. Nossa hipótese é que a hialuronidase atuará sobre a matriz extracelular, permitindo o acesso do inibidor de leucotrieno ao tumor, que por sua vez deverá ser liberado de forma lenta, possibilitando a preservação de sua atividade. O trabalho será realizado em duas etapas. Na primeira, será feita a caracterização da atividade pró- inflamatória de hialuronidases solúveis isoladas do veneno das espécies Crotalus durissus terrificus e Tityus serrulatus. Na segunda, serão elaboradas formulações de microesferas de polímeros com hialuronidase e com ou sem MK 886, e avaliar atividade: a - in vitro, em cultura de células tumorais; b – in vivo, após inoculação intratraqueal. Os dados obtidos poderão além de contribuir para a elucidação do papel da hialuronidase, propor uma nova estratégia terapêutica para o tratamento de tumores, com resultados que possibilitem publicações científicas com significativo impacto. Além disso, poderão ser úteis para a elaboração de uma estratégia terapêutica para o tratamento de tumores.