Clonagem e analise de expressao de um gene pertencente a familia pr-1 expresso pelo fungo moniliophthora perniciosa causador da vassoura de bruxa do cacaueiro.

Resumo

O fungo Moniliophthora perniciosa é o agente etiológico da vassoura de bruxa, principal doença que ataca o cacaueiro. Apesar da intensa busca por soluções para o problema, ainda não há medidas totalmente eficazes de combate à doença. A inspeção das bibliotecas de ESTs de M. perniciosa levou à identificação de um gene que codifica uma proteína pertencente à família PR-1 (Pathogenesis Related Protein-1). A maioria das Pathogenesis Related Proteins tem atividades enzimáticas bem caracterizadas (quitinases, glucanases, endoproteinases, etc.), com exceção das proteínas PR-1. Contudo, estudos têm demonstrado seus efeitos na inibição do desenvolvimento de oomicetos que infectam plantas e como induzidas durante a interação planta-patógeno. Este projeto visa à clonagem e análise de expressão do gene pertencente à família PR-1 encontrado em M. perniciosa. Para tal, o gene será totalmente seqüenciado e sua expressão será analisada por meio de ensaios de Northern blot a partir de RNA de fungos crescidos em meio mínimo com presença de diferentes aditivos. Desta forma, pretende-se caracterizar a influência de diferentes substratos na expressão do gene PR-1 deste fungo. Além disso, 6 gene MpPR-1 será clonado em um vetor de super-expressão de proteínas visando ensaios enzimáticos futuros. Com isso pretendemos ampliar o conhecimento desse gene no desenvolvimento de M. perniciosa e buscar inferências sobre seu papel durante a interação deste fitopatógeno com o cacaueiro. (AU)