Adicao de precursores em meio complexo soluvel para a producao de cefamicina c por streptomyces clavuligerus.

Resumo

O tema da presente proposta se insere em Projeto Temático direcionado ao estudo das etapas necessárias ao desenvolvimento de tecnologia de produção de compostos bioativos de Streptomyces. Neste Temático, ênfase especial tem sido direcionada à cefamicina C (CefC), um antibiótico beta-lactâmico sintetizado por S. clavuligerus, com a proposição de trabalhos relacionados a alternativas de processo global de produção, desde o melhoramento da linhagem produtora e desenvolvimento de bioprocessos e biorreatores, até sistemas de separação, extração e purificação. A biossíntese de CefC envolve uma série complexa de reações enzimáticas, que se inicia com duas etapas, limitantes e subseqüentes: a conversão de L-lisina em ácido L-alfa-aminoadípico (AAA) e a condensação deste aminoácido com cisteína e valina para formar o precursor dos antibióticos beta-lactâmicos, o tripeptídeo delta-(L-alfa-aminoadipil)-L-cisteinil-D-valina (ACV). Esta última reação é regulada por fosfato. Neste contexto, o presente projeto propõe buscar melhorias na produção de CefC por S. clavuligerus através de adição adequada de AAA e fosfato em meio de produção complexo solúvel visando, respectivamente, contornar a etapa limitante de conversão de L-lisina e induzir a formação do tripeptídeo ACV. Procurar-se-á relacionar dados de concentração de AAA e/ou ACV com a produção de CefC ao longo da fermentação. As concentrações de AAA e fosfato adicionadas serão definidas através de metodologia de planejamento experimental e os resultados, analisados através de metodologia de superfície de resposta. O meio de produção será composto por ingredientes solúveis selecionados com base em meios indicados na literatura como potencialmente propícios à alta produção de CefC. Assim, pretende-se buscar estratégias para aumentar a produção deste importante antibiótico, aliando-se aspectos bioquímicos e tecnológicos do bioprocesso, normalmente tratados distintamente. (AU)