Papel de N-glicanas em atividades desempenhadas por paracoccina

Resumo

Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da paracoccidioidomicose, a micose profunda de maior prevalência na América Latina. Dentre os fatores próprios do fungo capazes de aumentar sua patogenicidade são mencionados lipídeos, polissacarídeos e glicoproteínas. A glicosilação é importante para a secreção protéica, função, estabilidade e imunogenicidade. Proteínas N-glicosiladas têm sido caracterizadas em mamíferos e em algumas leveduras. Em P. brasiliensis, a lectina paracoccina com afinidade por N-acetil-glicosamina e quitina, foi identificada como exercendo papel relevante na biogênese da parede e no crescimento fúngico. Além disso, demonstrou-se que paracoccina interage com macrófagos do hospedeiro, induzindo-os a liberarem altas concentrações de TNF-α e óxido nítrico. Mais recentemente, constatou-se que a paracoccina exerce ainda atividade de N-acetil-ß-D-glicosaminidase (NAGase). O fato da molécula de paracoccina ser pesadamente glicosilada, somado a recentes evidências de que cadeias oligossacarídicas sejam requeridas para a atividade de algumas enzimas, motiva-nos a investigar o papel de N-glicanas em atividades desempenhadas por paracoccina, com ênfase às atividades NAGase e favorecedora do crescimento fúngico. Para tanto propomo-nos a cumprir as seguintes metas: (1) avaliação do efeito de tunicamicina (inibidor de N-glicosilação) no crescimento de P. brasiliensis; (2) avaliação do efeito de N-glicanas na atividade de NAGase(s) expressas pelo fungo; (3) avaliação do efeito de N-glicanas na atividade de NAGase de paracoccina; (4) caracterização do perfil estrutural e cinético da paracoccina nativa e desglicosilada; (5) tentativa de identificação de segundo mensageiro envolvido na atividade de NAGase, com ênfase ao AMPc. Nossa expectativa é de que o cumprimento dessas metas abra perspectivas para o esclarecimento da associação direta entre a expressão da molécula de paracoccina e o crescimento de P. brasiliensis. (AU)