Estudos funcionais da rgs-CaM, uma calmodulina supressora de silenciamento por RNA

Resumo

O silenciamento por RNA é um mecanismo conservado de resposta a moléculas de RNA dupla fita (dsRNA) presente em todos eucariontes, que desempenha papéis fundamentais na regulação da expressão gênica, na resistência a vírus e no controle da transposição de elementos móveis. Sabe-se que proteínas de diferentes origens, viral ou endógena, são capazes de suprimir o silenciamento por RNA, mas o mecanismo de ação da maioria delas não é totalmente compreendido. Um desses supressores endógenos é uma proteína do tipo calmodulina denominada rgs-CaM (regulator of gene silencing CaM) que foi identificada em plantas de tabaco. Calmodulinas são proteínas que desempenham papéis importantes na sinalização de cálcio em células eucarióticas e regulam a atividade de inúmeras proteínas com diversas funções celulares. Até hoje, entretanto, muito pouco se sabe sobre as propriedades regulatórias da proteína rgs-CaM. Pensando nisso, o presente projeto tem como objetivo caracterizar funcionalmente a proteína rgs-CaM de tabaco. Para tal, diferentes abordagens serão utilizadas: estudo de interação com a proteína viral HC-Pro, localização subcelular desta interação, identificação de proteínas endógenas que interagem com a rgs-CaM, e análise funcional de plantas silenciadas para o gene que codifica a rgs-CaM.