Influência da vitamina D por via intratumoral na proliferação e expressão de genes alvo de xenoenxerto de câncer de mama de pacientes pós-menopausadas

Resumo

Relação entre menor exposição solar e produção reduzida de vitamina D pela pele com maior incidência e mortalidade por câncer de mama foi previamente sugerida. De acordo com esta hipótese, relata-se que mulheres com câncer de mama apresentam menor concentração sérica de 1,25(OH)2D3 e 25(OH)D3 em relação a mulheres sem a doença. Demonstrou-se também que níveis séricos mais altos de 1,25(OH)2D3 e 25(OH)D3 ocorrem em mulheres com doença em estádio inicial em relação a portadoras de doença metastática óssea e que deficiência de 25(OH)D3 esteja associada a pior prognóstico da doença.A vitamina D exerce suas ações através de receptores nucleares específicos, os receptores de calcitriol ou 1,25(OH)2D3 (VDR), os quais foram demonstrados em linhagens e espécimes de câncer de mama, indicando que a via da vitamina D pode ser um potencial alvo anti tumoral.O mecanismo proposto para a parada de proliferação em fase G0/G1 induzida por 1,25(OH)2D3 foi estudado em linhagens de câncer de mama e envolve indução da expressão de moléculas como inibidores de quinase dependente de ciclina como p21WAF1/CIP1 (CDKN1A) e p27KIP1 (CDKN1B); fator de crescimento transformante B, TGFB (que pode inibir a proliferação de células epiteliais), receptores de TGFB e proteína ligante-3 de fator de crescimento insulina-símile (IGFBP-3), que regula a disponibilidade de fator de crescimento insulina-símile (IGF), um importante mitógeno para células mamárias normais e de câncer de mama. A maioria destes dados resulta de estudos de células de câncer de mama em cultura, onde a relação epitélio-mesênquima não é considerada, e empregando concentrações supra-fisiológicas de vitamina D (10-100 nM), associada com hipercalcemia em seres humanos. Logo, as ações do calcitriol no tumor in vivo ainda não estão esclarecidas.Dados recentes de nosso grupo indicam que a suplementação de calcitriol a pacientes pós menopausadas com câncer de mama pode reduzir a proliferação tumoral. Além disso, um pequeno estudo sugere que análogo de vitamina D pode estar associado a benefício clínico, quando administrado por via tópica a pacientes com câncer de mama metastático. Portanto, nosso objetivo é avaliar os efeitos da administração intratumoral de calcitriol na proliferação, apoptose e expressão de genes alvo em xenoenxertos de câncer de mama. Para isso, amostras tumorais obtidas de pacientes com câncer de mama serão transplantadas em camundongos-fêmea imunodeprimidos. O uso de fragmentos tumorais a fresco reduz a interferência relacionada ao uso de linhagens de câncer mantidas por longo tempo em cultura. Além disso, as fatias mantêm a relação epitélio-mesênquima, permitindo uma análise integrada dos efeitos de determinado tratamento sobre o tumor. A um grupo de camundongos, será administrado calcitriol por via intra tumoral (em concentração elevada, mas que pode ser administrada a seres humanos segundo estudos clínicos fase I) em contraste ao grupo controle. Pretendemos assim, esclarecer se o calcitriol pode ter efeito anti-tumoral in vivo. (AU)