Triagem de mutações e polimorfismos de genes candidatos à malformação dentária em pacientes com fissura labiopalatina

Resumo

A fissura labiopalatina é uma anomalia craniofacial comum em humanos, e pode ocorrer como característica de um quadro sindrômico ou isolada, quando os indivíduos afetados não apresentam qualquer anomalia estrutural associada. A etiologia das fissuras labiopalatinas é complexa, com a contribuição de componentes genéticos e ambientais. Alguns autores consideram as fissuras labiopalatinas como parte de um fenótipo amplo, e sugerem que características clínicas adicionais, como a presença de anomalias dentárias, poderiam ser utilizadas para uma melhor descrição do fenótipo individual em investigações genéticas. Defeitos na formação do esmalte dental são frequentes em pacientes com fissura labiopalatina e a sua intensidade parece depender da severidade da fissura. Malformações dentárias afetam o esmalte em diferentes intensidades, promovendo desde a deficiência na formação até defeitos no conteúdo mineral e proteico. O desenvolvimento do esmalte envolve a expressão de múltiplos genes necessários para controlar o complexo processo de mineralização. Mutações nos genes de proteínas e proteases do esmalte são associadas à malformação dentária. O objetivo desse trabalho será investigar a ocorrência de mutações e polimorfismos, incluindo SNPs, nas regiões codificadoras e de splicing de genes candidatos a defeitos na formação do esmalte dental, em pacientes com e sem fissura labiopalatina. Para análise dos genes propostos será coletada saliva de 120 pacientes. Será realizada a extração do DNA genômico da saliva, seguida da PCR e sequenciamento direto. Cada mutação e/ou polimorfismo identificado no sequenciamento será confirmado repetindo-se a reação em um novo produto de PCR. Após a coleta, os dados serão devidamente analisados por meio de gráficos e tabelas, sendo utilizado teste do Qui-quadrado (x2) entre os grupos dentro do mesmo ensaio. Caso necessário, outros testes poderão ser aplicados. Será adotado nível de significância de 5% para que as diferenças sejam consideradas estatisticamente significativas. (AU)