Caracterização Estrutural e Funcional da Crotoxina e de Sua Subunidade Básica na Junção Neuromuscular e Influência de Agentes Neutralizadores

Resumo

A crotoxina é a principal fração tóxica do veneno da Crotalus durissus terrificus. Esta proteína é um complexo heterodimérico constituída por uma subunidade básica, com atividade fosfolipase A2 (PLA2), conhecida como crotoxina B (CB), e por uma subunidade ácida não-enzimática que atua como carreador, denominada crotapotina (CA). Estudos farmacológicos revelaram que a junção neuromuscular constitui um dos principais sítios de ação desta toxina, causando paralisia muscular devido a uma somatória de efeitos pré e pós-sinápticos. Recentemente, trabalhos de cristalografia elucidaram a estrutura tridimensional da CB, do veneno da Crotalus durissus terrificus, possibilitando o avanço no conhecimento de sítios moleculares envolvidos na toxicidade desta proteína. Apesar dos esforços dedicados ao tema, o mecanismo de ação e o sítio molecular de ação da crotoxina ainda não são bem conhecidos. Em vista do exposto, o presente projeto tem por objetivo identificar possíveis inibidores da crotoxina ou de sua PLA2 para, posteriormente, elucidar os sítios teóricos de ligação entre o inibidor e a CB. Em adição, investigar a cinética da liberação do neurotransmissor sob a influencia da crotoxina ou da CB, através da quantificação de acetilcolina marcada com tritio e da avaliação da exocitose do mediador químico em tempo real, possibilitando assim, avançar no conhecimento do mecanismo de ação desta toxina.