Análise de genes envolvidos na regulação do ciclo celular e seu controle por proteínas ribossomais na gênese molecular dos adenomas hipofisários

Resumo

O gene CDKN1B/p27kip1 é regulador do ciclo celular, alvo da via c-MYC e controla a formação de complexos entre a ciclina E e CDK2 (kinase dependente de ciclina 2). Em tumores associados à neoplasia endócrina múltipla tipo 4, seu mRNA é transcrito, mas a proteína não é expressa. Ainda, sua expressão encontra-se reduzida em adenomas hipofisários esporádicos. Proteínas Ribossomais (RP) tem sido recentemente envolvidas em tumorigênese, devido sua capacidade de regular transcrição gênica e tradução de mRNAs. A RPS13 inibe a expressão de CDKN1B/p27kip1 em câncer gástrico; até o momento, não há estudos que avaliem se a redução de CDKN1B/p27kip1 em tumores hipofisários se deva à hiperexpressão de RPS13. A redução da atividade da enzima diskerina, codificada pelo gene DKC1, afeta a tradução de uma classe de mRNA portadores de sítio Interno de Entrada Ribossomal (IRES), incluindo o CDKN1B/p27kip1. Em camundongos, redução da atividade da diskerina, com redução da tradução de CDKN1B/p27kip1, aumentou a tumorigênese hipofisária. Em humanos, mutação somática do DKC1 (DKC1S485G) foi encontrada em adenoma hipofisário. Dessa maneira, as proteínas ribossomais, através da regulação de p27, parecem estar relacionadas à tumorigênese hipofisária. Este estudo visa investigar mutações e presença de hipermetilação no gene DKC1 em tumores hipofisários não secretores e secretores de ACTH e GH. Ainda, avaliar nesses tumores e em linhagens celulares tumorais secretoras de GH (GH3), ACTH (AtT-20) e de adenomas não secretores (±T3-1), por qPCR, a expressão de c-MYC, DKC1, CDKN1B/p27kip1, CDK2 e RPS13 e a expressão protéica, por Western blot. Finalmente, confirmar os resultados por meio de estudos funcionais, melhor definindo o papel destes genes na tumorigênese hipofisária. (AU)