Caracterização da rede de regulação cardiogênica controlada por Coup-TFII a partir de células-tronco embrionárias

Resumo

Redes de regulação gênica (RRG) compostas por fatores de transcrição representam o principal componente molecular atuando na manutenção ou alteração do estado celular. Dentre elas, a caracterização da RRG controlando o desenvolvimento cardíaco é de grande interesse pelo potencial de aplicação dos conhecimentos gerados na área da saúde humana. Diversos genes e interações genéticas fundamentais para a diferenciação cardíaca têm sido caracterizados, principalmente durante os estágios iniciais da diferenciação. Entretanto, pouco se sabe sobre as fases conseguintes do desenvolvimento cardíaco, como a padronização do eixo antero-posterior do tubo cardíaco. Esta etapa é controlada pelo gradiente de ação da via de sinalização do Ácido Retinóico, que promove a subdivisão do tubo cardíaco em uma região anterior, equivalente ao truncus, uma região intermediária, correspondente aos ventrículos, e uma região posterior, composta pelo compartimento sino-atrial. O fator de transcrição Coup-TFII (chicken ovalbumin promoter-transcription factor II) possui um papel fundamental na formação das estruturas posteriores do coração, e possui vários atributos que o apontam como um forte candidato para a modulação da ação da via de AR durante a padronização cardíaca. Como um fator de transcrição, a ação de Coup-TFII é mediada pela sua capacidade de influenciar direta ou indiretamente, assim como negativa ou positivamente, a expressão de genes alvos. O objetivo deste projeto é caracterizar a RRG completa controlada por Coup-TFII durante o desenvolvimento cardíaco em camundongos. Como uma alternativa ao uso do modelo animal, o estudo será realizado também em cardiomiócitos derivados in vitro a partir de células-tronco embrionárias. O estudo irá utilizar as técnicas de imunoprecipitação de cromatina em conjunto com sequenciamento de DNA (ChIP-seq) e o silenciamento gênico por RNAi para identificar todos os genes regulados direta ou indiretamente Coup-TFII durante a diferenciação cardíaca in vivo e a partir de CTE. (AU)