Ontogenia do ritmo circadiano do eixo Hipotálamo-Hipófise-Adrenal em ratos da linhagem Wistar: comparação da expressão dos genes do sistema "Clock" e do ritmo circadiano da corticosterona.

Resumo

Os ritmos biológicos resultam da interação do marca-passo circadiano endógeno e os agentes sincronizadores ambientais. Os genes do relógio e proteínas expressas têm sido descritos como responsáveis de criar ciclos moleculares associados com o ciclo de 24h ambiental. A atividade do eixo Hipotálamo-Hipófise-Adrenal (HHA) apresenta um padrão de secreção circadiano, onde níveis circulantes de glicocorticóides flutuam ao longo das 24 horas. De forma recíproca, o eixo HHA influencia a atividade/ritmo circadiano do sistema "Clock", onde os glicocorticóides afetam os relógios periféricos em quase todos os órgãos e tecidos. O núcleo supraquiasmático (NSQ) apresenta ritmicidade na expressão de alguns genes do sistema "Clock" entre o 2° e 10° dia após o nascimento e o ritmo circadiano da secreção de corticosterona plasmática é detectado a partir do 16° dia pós-natal em ratos da linhagem Wistar. Na adrenal do rato adulto há expressão rítmica das proteínas envolvidas na esteroidogênese porem é desconhecida a idade pós-natal em que esta ritmicidade começa se apresentar e se está sincronizada com a ontogenia do ritmo circadiano da expressão dos genes do sistema "Clock" e da secreção de corticosterona. No presente estudo, serão avaliadas as expressões das proteínas CLOCK/BMAL1, PERs, CRYs, ROR, NR1D1 (Western Blotting), e dos genes Clock, Bmal1, Per1, Per2, Per3, Cry1,Cry2, Rev-erb± e ROR± (PCR em tempo real TaqManÔ) no NSQ, e das proteinas StAR e MC2R na adrenal, cujas flutuações circadianas parecem ser moduladas pelo sistema "Clock". Simultaneamente serão determinadas as variações diurnas das concentrações de corticosterona plasmática em filhotes de ratos em diferentes momentos após o nascimento. Diferenças entre os grupos serão analisadas por métodos não paramétricos teste de Mann-Whitney e teste exato de Fisher. Correlações serão calculadas pelo teste de Spearman. O nível de significância adotado será de 5%.