Avaliação da infecção e imunidade de linhagens de aves (Gallus gallus) suscetíveis e resistentes ao desafio por Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum

Resumo

Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG) pertence ao sorogrupo D de Salmonella enterica subesp. enterica e causa o tifo aviário em aves, uma doença caracterizada por alta mortalidade e morbidade em aves. O controle desta doença nas criações avícolas comerciais é realizado pela combinação de medidas de biossegurança, incluindo a vacinação de aves. Este biovar hospedeiro-específico é capaz de infectar galinhas em todas as idades. O quadro da enfermidade varia entre as diferentes linhagens de aves comerciais. Aves de postura vermelhas de linhagem semi-pesada são altamente suscetíveis à infecção por SG e desenvolvem quadros severos e alta taxa de mortalidade em qualquer idade. Ao contrário, as aves de postura brancas de linhagem leve são resistentes à infecção e apresentam baixa mortalidade após a infecção. Este estudo foi formulado para avaliar a imunidade contra SG em dois diferentes experimentos. No primeiro estudo será avaliada a resposta imune inata após a infecção de aves de postura de ovos de linhagem leve (branca) e linhagem semi-pesada (vermelhas). Às 4h, 2 e 6 dias pós-infecção (dpi) aves das duas linhagens serão sacrificadas para a colheita de amostras para a avaliar a infecção bacteriana. Adicionalmente, a resposta imune celular será avaliada através da detecção de macrófagos e linfócitos T ³´ por imuno-histoquímica. A técnica de RT-PCR em tempo real será utilizada para quantificar a expressão de receptores envolvidos na detecção das bactéria e citocinas pró-inflamatórias. Em outro experimento, será avaliada a resposta imune adquirida de aves vacinadas com uma estirpe atenuada de SG, com deleção dos genes cobS e cbiA (SG”cobS”cbiA) com comprovado potencial vacinal contra SG selvagem (FAPESP Proc. N. 2007/53479-0). Este estudo terá o objetivo de identificar os elementos importantes envolvidos na proteção contra o desafio pela estirpe patogênica de SG. Para isso, a resposta será avaliada após a imunização com quinze e 1 dia antes da infecção (dai) e com 1, 3 e dez dias após a infecção (dpi) com SG. A técnica de RT-PCR em tempo real, será utilizada para quantificar a expressão de citocinas imunomodulatórias e o método de citometria de fluxo será utilizado para quantificar os linfócitos T efetores (CD4+CD44+ e CD8+CD44+). Os níveis de imunoglobulinas das classes IgM e IgG serão mensurados por ensaios imunoenzimáticos (ELISA Indireto). Ao final deste estudo se planeja gerar conhecimento sobre a as diferentes respostas imunes em aves vacinadas ou naturalmente resistentes ou suscetíveis à infecção por SG. (AU)