Caracterização estrutural e funcional da interação entre a chaperona alfaB-Cristalina e a tirosino-fosfatase Shp2.

Resumo

A pesquisa da patogênese da hipertrofia e insuficiência cardíacas tem uma importante fronteira no estudo de circuitos de sinalização celular envolvidos na resposta de cardiomiócitos frente a estímulos fisiopatológicos. Os vários circuitos envolvidos nesse processo apresentam configurações complexas, compostas de proteínas de distintas classes funcionais, incluindo-se quinases, fosfatases, proteases, proteínas adaptadoras, chaperonas e fatores de transcrição. Em estudos anteriores exploramos a participação de proteínas como a Shp2, FAK e alfaB-Cristalina na resposta de cardiomiócitos a estímulos mecânicos e neuro-humorais. A Shp2 é uma tirosino-fosfatase envolvida no desenvolvimento do coração e na regulação do miocárdio adulto, e mutações neste gene resultam em síndromes genéticas como Noonan e LEOPARD, doenças cardíacas e câncer infantil. A modulação da atividade da FAK por Shp2 é crítica para a sinalização hipertrófica de cardiomiócitos, enquanto a interação da FAK com alfaB-Cristalina protege a FAK contra degradação e promove a sobrevivência dos cardiomiócitos. A alfaB-Cristalina é uma chaperona altamente expressa no coração, com papel na modulação da resposta hipertrófica, manutenção da integridade e regulação da atividade de moléculas de sinalização. Apesar de evidências indiretas que sugerem a interação funcional entre Shp2 e alfaB-Cristalina em cardiomiócitos, tanto a natureza como a importância dessa interação são ainda desconhecidas. Assim, o presente projeto tem como foco o estudo da interação entre Shp2 e alfaB-Cristalina do ponto de vista estrutural e suas repercussões funcionais em cardiomiócitos. Estudos preliminares indicaram uma interação física entre Shp2 e alfaB-Cristalina in vitro, e a presente proposta contempla a confirmação desses resultados, a determinação da superfície de interação, investigação da influência da interação na atividade de Shp2 e as consequências da interação no fenótipo de cardiomiócitos.A interação entre tais proteínas pode configurar um novo mecanismo de regulação da atividade proteica, no qual a alfaB-Cristalina atue como uma plataforma para a estabilização de moléculas de sinalização críticas para miócitos cardíacos. O detalhamento da estrutura e função do complexo e mecanismos de sinalização poderá guiar o surgimento de novas abordagens terapêuticas para as doenças relacionadas.