Estudo comparativo da extração de DNA em diferentes fontes de material biológico para a realização da reação em cadeia da polimerase (PCR) no diagnóstico da Doença Renal Policística em felinos da raça Persa

Resumo

A Doença Renal Policística Autossômica Dominante (DRPAD) é uma das doenças congênitas hereditárias que mais acomete os gatos, principalmente felinos da raça Persa, sendo caracterizada pelo desenvolvimento de cistos no parênquima renal e, eventualmente, em outros órgãos, levando ao comprometimento de suas funções e prognóstico de reservado a ruim. A DRPAD em felinos tem, como principal alteração genética, a transversão do nucleotídeo citosina para adenina na posição 3284 do éxon 29 do gene PKD1 (Polycystic Kidney Disease 1), resultando em um códon de parada prematura no RNAm. Inicialmente, sabe-se que estes cistos podem surgir em qualquer faixa etária e de maneira silenciosa, o que dificulta o diagnóstico precoce, uma vez que uma das formas clássicas para identificá-los é através do exame ultrassonográfico. No entanto, na maioria das vezes o exame de imagem é realizado apenas quando o animal já apresenta alguma alteração clínica em fases avançadas da doença, tais como polidipsia, hematúria e poliúria. Portanto, a avaliação genética ainda é considerada o teste mais seguro e eficiente para o diagnóstico precoce da DRPAD em felinos. Por outro lado, quanto mais prática for a coleta do material biológico para avaliação genética, maior será a chance de adesão ao exame diagnóstico por parte dos proprietários e menor será o estresse pelo qual o animal será submetido. Atualmente, o padrão ouro para extração do DNA genômico é através do sangue, método invasivo que exige a participação ativa do médico veterinário e, muitas vezes, conta com a colaboração do animal. Assim, este trabalho tem como principal objetivo testar e padronizar a extração de DNA genômico de materiais biológicos de fácil coleta em gatos da raça Persa, tais como células da mucosa epitelial bucal e pelos, utilizando diferentes métodos de extração. Para verificação da eficiência de cada amostra, a quantidade e qualidade do material genético extraído serão avaliadas em comparação com o sangue dos mesmos animais, além da realização do PCR e RFLP para identificação da mutação no éxon 29 do gene PKD1 felino. Estes dados poderão auxiliar os proprietários e médicos veterinários no diagnóstico precoce da DRPAD, além de auxiliar no controle e erradicação da doença nos criadores de gatos da raça Persa.