Eletroporação e fusão de vesículas eletricamente carregadas

Resumo

Vesículas unilamelares gigantes (GUVs) são bons modelos de membrana para investigação de processos biológicos. Seu uso permite que os eventos estudados possam ser observados por microscopia ótica. Neste projeto, propomos estudar vários aspectos biofísicos de membranas de GUVs negativamente carregadas na presença de um campo elétrico - pulso elétrico, e durante a fusão com membranas de cargas opostas. Esses experimentos serão realizados no Instituto Max Plank de Coloides e Interfaces, onde várias ferramentas avançadas estão disponíveis. Especialmente, o uso de uma câmera de alta resolução temporal permitirá medir a tensão de linha do poro na GUVs contendo diferentes frações do lipídeo negativamente carregado POPG, e eventualmente do lipídeo positivamente carregado, DOTAP. Essas medidas irão direcionar na condução dos experimentos subsequentes, incluindo a medida do módulo de curvatura da membrana, composição lipídica da borda do poro, tamanho de poros remanescentes após a aplicação do pulso elétrico, tipo de lipídeos usados para fusão entre membranas, entre outras. Em conjunto, essas informações esclarecem o papel de cargas elétricas no desenvolvimento de vários processos que ocorrem não apenas em membranas-modelo, mas também em células vivas. (AU)