Clonagem, expressão e caracterização das L-asparaginases de Saccharomyces cerevisiae e comparação com as L-asparaginases bacterianas usadas no tratamento de Leucemias.

Resumo

A L-Asparaginase (ASPase) foi descoberta em meados dos anos 1960 e é utilizada até os dias de hoje como um dos principais biofármacos no tratamento de leucemias. É uma enzima capaz de catalisar a clivagem do aminoácido asparagina (Asn) produzindo ácido aspártico e amônia. Isso impede a captação extracelular de Asn pelas células neoplásicas, causando diminuição da produção proteínas e consequentemente de DNA, RNA, alterando o ciclo celular e induzindo a apoptose. As células leucêmicas, ao contrário das células normais, possuem pouca ou nenhuma presença de asparagina sintetase, tornando-as completamente dependente do consumo extracelular desse aminoácido. As ASPases comercialmente disponíveis são de origem bacteriana e são indutoras de remissão da leucemia linfoblástica aguda em crianças (do inglês acute lymphoblastic leukemia -ALL) e outras. A maior dificuldade atualmente é reação alérgica e indução de resposta imune causada pela administração de uma proteína bacteriana em humanos. Além disso, e talvez mais importante, a despeito de sua importância no tratamento de leucemia infanto-juvenil, a empresa no exterior fornecedora do medicamento para o Brasil, descontinuou a produção de ASPase. As ASPases obtidas da levedura de S. cerevisiae, produzida pelos genes ASP1 e ASP3, são ainda pouco estudadas e poderiam ser mais uma opção para a terapia antineoplásica. O estudo em questão procura produzir em grande quantidade as ASPases de S. cerevisiae e caracterizar sua cinética enzimática em comparação com as isoformas bacterianas para avaliar se sua utilização é possível para o tratamento de ALL.