Galleria mellonella como modelo hospedeiro para estudo de Porphyromonas gingivalis: análise da virulência e sensibilidade à terapia fotodinâmica

Resumo

O objetivo desse trabalho será desenvolver um modelo in vivo em Galleria mellonella para o estudo de Porphyromonas gingivalis, uma bactéria anaeróbia estrita importante para pesquisas em Odontologia. Será desenvolvido um modelo para estudo da virulência de P. gingivalis e para teste de terapias antimicrobianas, como a terapia fotodinâmica. Para estudo da virulência, diferentes concentrações de P. gingivalis serão inoculadas em Galleria mellonella e o desenvolvimento de infecção experimental será analisado por meio da curva de sobrevivência e contagem de hemócitos, que são as células do sistema imune presentes na hemolinfa desse animal. Para a avaliação de G. mellonella como modelo de estudo da terapia fotodinâmica, serão efetuados testes de toxicidade com diferentes concentrações do fotossensibilizador azul de metileno, assim como testes para determinação dos parâmetros ideais de irradiação luminosa (Laser AsGaAl 660nm). A seguir, grupos de larvas de G. mellonella infectadas com P. gingivalis serão submetidas a 4 condições experimentais: inoculação do Fotossensibilizador e aplicação do Laser (F+L+), inoculação de Solução fisiológica e aplicação do Laser (F-L+), inoculação do Fotossensibilizador sem Laser (F+L-) e inoculação do Solução fisiológica sem Laser (F-L-). Os efeitos da PDT sobre a infecção por P. gingivalis serão avaliados pela análise de curva de sobrevivência das larvas. Os dados obtidos na curva de sobrevivência de G. mellonella serão analisados pelo método de Log-rank e na contagem de hemócitos pelo teste ANOVA, considerando-se nível de significância de 5%.