Avaliação do papel da aspartil protease secretada (PbSAP) na virulência e no dimorfismo do fungo patogênico Paracoccidioides brasiliensis

Resumo

Paracoccidioides brasiliensis, fungo dimórfico termo-dependente, é o agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM). A infecção pelo fungo ocorre por inalação de conídeos presentes no meio ambiente. Para o desenvolvimento da doença é imprescindível que os conídeos alojados nos alvéolos pulmonares passem para a fase leveduriforme, sendo esse evento dependente do aumento da temperatura. O desenvolvimento da doença depende de fatores associados com a resposta imune do hospedeiro e características do agente infeccioso, principalmente a virulência. Alguns componentes foram apontados como potenciais fatores implicados na virulência do P. brasiliensis e na interação parasita/hospedeiro, porém poucas moléculas envolvidas com a patogenicidade do fungo foram descritas. Estudos de proteômica quantitativa realizados em nosso laboratório utilizando o isolado Pb18 com distintos graus de virulência mostraram que existem diferenças no conteúdo proteico entre esses isolados, e as proteínas encontradas diferencialmente expressas no isolado Pb18 virulento mostraram-se como potenciais fatores de virulência. Entre as proteínas com a expressão aumentada destaca-se a proteína vacuolar A, também denominada como sendo a aspartil protease secretada - PbSAP de P. lutzii (antigamente conhecido como Pb01). A expressão desta proteína mostrou-se 7,1 vezes maior no isolado Pb18 virulento quando comparado a Pb18 atenuado. As aspartil proteases secretadas são descritas como tendo papel importante na infecção de muitos fungos patogênicos. O estudo desta proteína secretada pode auxiliar no entendimento dos mecanismos de infecção do P. brasiliensis. Desse modo, este projeto busca investigar o papel da PbSAP na virulência do P. brasiliensis (isolado Pb18). Para tanto, será realizado o silenciamento do gene PbSAP através da tecnologia de RNA anti-sense associado a transformação mediado por Agrobacterium tumefaciens. Este estudo poderá contribuir, de forma significativa, para o entendimento do papel desta protease na patogênese da PCM, possibilitando a identificação de novo alvo terapêutico ou mesmo biomarcador de virulência nesta importante micose sistêmica. (AU)